玉米粗线期染色体的高分辨率染色粒图1).pdfVIP

遗传 学报，19(2);145-149,11992 滩eta GeneticaSinica 玉米粗线期染色体的高分辨率染色粒图’‘ 沈 大 棱 复（旦大学遗传研究所，上海200433) MadelineWu 汪（黔生） (Departmen；ofBiologicalScte，cesUniversityofMarylandBaltimore Count，Catonsville，Maryland21228USA） 经温和固定和展片的玉米小抱子母细胞减数分裂的粗线期染色体，在电镜下，着丝粒和 大量的电子致密的染色粒清晰可辨。其数量和位置自减数分裂早偶线期至早双线期是稳定和 可重复的。为此，我们对粗线期的10条双价体中各条分别进行详细的染色粒分析，构建了一 个完整的染色体组的染色粒图。总共识别和定位了达43。土12根（据7套染色体组计数平均） 染色粒。染色粒图可用于确定原位杂交法定位基因的详细分布区域，染色体重排中断点的定 位，识别外源单价体和由于不联会或脱联会而产生的单价体等。 关键词 粗线期，染色粒，染色粒图，染色粒图式 在高等脊椎动物中，显示各染色体全长上的带纹的高分辨率分带技术，可以准确地 鉴别各个染色体，也用于染色体变异部分的高分辨率细胞遗传分析以及由原位杂交法确 定基因位置的详细作图[11,12,23;。可是在多数植物体细胞染色体中应用这些技术未能成 功3,‘41。近年来，我国学者在植物染色体G带工作方面，取得了显著的成就[1]。植物G带虽 较之C带要明细许多，但与动物G带、特别是与高分辨率带比较，还有一定的差距。如玉 米具丰富G带的第2染色体，仅8-9条带纹。我们曾将多种分带技术应用在玉米体细胞 染色体上，结果都不能令人满意。大多数经典的玉米细胞遗传学研究是用减数分裂粗线 期的染色体进行的14「,157。从多篇已发表论文的显微照片中可以看到，在染色体的某些特 殊区域含有染色粒。但尚无完整的图式的报道。由于使用电镜能分辨出某些更细小的染 色粒，所以，我们进行了这项构建玉米染色体组的全套染色粒图的研究。 在人类与仓鼠材料的研究中，人们比较了粗线期染色粒图式和有丝分裂中期的G带。 结论是不管染色粒或是G带，两者都反映染色体有一种基本结构组织8【,101。 对人类的第 10,16,17,]8,19和20的染色体研究工作表明；深色的G带代表着染色粒的结合。在粗 线期所看到的形态上的详细程度要比G带增加6倍6,『71。因此，有人建议将粗线期染色粒 图作为一种高分辨率基因作图的参照标准和确定染色体变异的明细位置91〔O 玉米是一种常被选作分子、细胞和发育研究的显花植物，有丰富的遗传学标记及细 胞遗传学材料可供利用。人们已经搜集了广泛的作图和未作图的遗传学及细胞遗传学资 本文于1990年3月31q收到。 功我们特别感谢 B‘麦克林托克博士的热情支持，和协助鉴定部分染色体。此项研究是得到美国 NSF-DCB 8502732项目的资助和马里兰大学农业生物技术中心的部分资助。 146 遗 传 学 报 19卷 料(2D]。新近，一种灵敏的原位杂交技术使单拷贝基因作图成为可能1181。一个详细的染色 粒图将有助于克隆基因或 DNA片段的细胞遗传学分析。 材 料 与 方 法 玉米 Z（eamays)38-11和 W-23是由MaizeGeneticsStockCenterUniv.of Illinois提供的。品种81--49是由丁玉澄博士赠送的。这些品种播种于温室，6-8个星 期后，采集雄花花序的主穗。选择一些小花的花药作样品，加醋酸洋红压片并用显微镜 观察，判断它们所处的减数分裂时期，然后将适合的雄花用甲醇：乙酸 (3:1V/V)固定 3--24小时，制备染色体。先用解剖针将花药中的细胞挤压到含有一滴45外醋酸，并事先 经过洗液处理的载玻片上。用细镊子去除花药壁和碎片，盖上经过硅化处理的盖玻片。轻 轻地挤压，染色体便从细胞中释放并伸展开来。经相差显微镜简易地镜检，具良好染色体 分裂相的载