玉米子房离体受精结实.pdfVIP

第4卷 第4期 遗 传 学 报 Vol.4 No.4 1977年 12月 ACTA GENETICA SINICA Dee 1977 玉米子房离体受精结实 邵启全 蒋兴邮 李金国 陈永强 （中国科学院遗传研究所） 从未授粉玉米植株的雌穗取下完整的子房，接种在试管或三角瓶中的琼脂一马铃薯培养基 上。 将消毒后的雄花花粉在无菌条件下授在花丝上，其受精率和结实率分别达 到48o和 9.1％最高结实率达到31.8%。种子而后的发育程度差别很大。在同一块果穗上有的子房 在授粉5夭后就可用肉眼看出在形成种子，而有的子房则需在 12天后才能看出是在形成种 子。在8批试验中共得种子70粒，其中发育完全的种子23粒。从种子长成植株。 自从1962年首次报道婴粟 (PapauersomniferumL.)[11胚珠的离体授粉和受精以后， 在双子叶植物的茄科、十字花科、石竹科的代表七个属的其它植物做了类似的工作[2-［710 这种技术被用来克服种间杂交的不亲和性，并取得了石竹科的几个种间的杂种41「。这使 人们开始注意到应用这种技术于禾谷类作物的遗传与育种研究上的重大潜力。1975年曾 有人用玉米子房进行离体受精试验，但未获得成功。直到1977年我们才看到第一篇关于 单子叶禾谷类玉米子房离体受精成功的报道[810 鉴于这项工作采用的是全合成培养基， 在推广使用方面存在一定困难。我们首先利用马铃薯天然提取物为主的简化培养基做了 玉米子房离体受精试验，获得了成功，现简报如下： 一、试验材料和方法 作为母本的试验材料有单交种京黄 113蹲子黄XW59E)，地方品种八跄白，自交系 获白、栖白。作为父本采用了具有紫色标记性状的单交种 西（丰红骨 XChase),Chase自 交系，地方品种紫胚、紫玉米、红糖、红刺等。 母本材料在果穗抽丝前进行严格套袋。待抽丝后4--5天，将果穗取下，先将顶部花 丝剪去，随后剥除果穗的包叶。在剥除外层5-6片包叶时，每片用70多的酒精擦洗消 毒。在剥除里层的4-5片包叶时可用无菌解剖刀和镊子剥除。 到剥除最后的一片叶片 时，将果穗向下，以免花丝缠乱，再用经酒精消毒的剪子，将花丝剪去，每个子房上留下。．， -1.5厘米长的花丝。然后将果穗放在无菌的大培养皿里。用解剖刀切除果穗的顶部。 将果穗的中下部切成10个子房一块的小块。把果穗块置于培养基正中，花丝向上，以利授 粉。 简化马铃薯培养基的成分：尿素0.5克／升；KH2P040.5克／升；赤霉素1毫克／升； FcS0427.8毫克／升；Na-EDTA37.3毫克／升；蔗糖100克／升；琼脂8克／升；30%马铃 薯提取液加水至1,000毫升。 取500毫升水加入300克新鲜马铃薯煮沸后 30分钟的过滤液，再加水至一公升，调 本文于 1977年8月3日收到。 330 遗 传 学 报 斗卷 PH至，.6，和玉米穗轴汁液的PH相同。将培养基分装到三角瓶或试管中，在 1.5公斤压 力下消毒20分钟。 花药消毒和授粉：把刚刚开花，花药外露，但尚未散粉的玉米雄花穗剪下，放在消毒 过的小盒中。在无菌箱中用20瓦紫外灯管2（537入短波）照射30-40分钟，相距30厘米， 充分杀死花序和花药表面的细菌。经过灭菌后，花药开始散粉时，在无菌条件下用无菌镊 子轻轻夹起花药，将花粉均匀地散落在玉米的花丝和子房上，然后放在2530℃的室温条 件下进行培养。 二、试 验 结 果 从7月，日至7月23日共作了8批试验。逐步解决了花粉消毒的问题，使污染率由 92.8务降低到6.7多。克服花粉污染的办法，是将取花药的时间提前到清晨6点半左右， 放置1小时，在接种前半小时进行紫外线消毒，消毒后立即进行授粉。 最早，在授粉4天以后，就能看到子房显著膨大的情况 （图版Is1)，到第6-10天时， 用肉眼就可以基本判定受精成功的情况 （图版1,2)。为了精确计算，一律在授粉15天