番茄花柄脱落区多聚半乳糖醛酸酶提取与纯化.pdfVIP

番茄花柄脱落区多聚半乳糖醛酸酶的提取与纯化1 徐杨，齐明芳，李天来，许涛 沈阳农业大学园艺学院，辽宁省设施园艺重点实验室，沈阳 (110161) E-mail：qimf@ 摘 要：多聚半乳糖醛酸酶是植物器官脱落过程中的重要水解酶，本实验以20µL•L-1 乙烯 处理的离体番茄花柄为试材，建立了与脱落相关的多聚半乳糖醛酸酶提取与纯化体系：以 50mmol•L-1 乙酸缓冲液(pH=5.5)为提取液，加入0.1mol•L-1NaCl ，1mmol•L-1DTT 提取效果 较好；将酶的粗提液低温浓缩后，经Sephadex G-75 凝胶层析分离纯化，最佳条件为流速为 0.2mL•min-1 、上样量为3.5mL；再将凝胶层析分离的活性部分低温浓缩后，经CM Sepharose CL-6B 离子交换层析再次纯化，流速0.3mL•min-1、洗脱液pH 值为 5.5 纯化效果好。结果 表明Sephadex G-75 凝胶过滤层析和CM Seph