毛白杨环氧水解酶的异源表达及其在催化拆分手性环氧化物中的应用.pdfVIP

饪 伽 报 2012 ChineseJournalofCatalysis V_01．33N0．2 文章编号：0253．9837(2012)02．0302．06 DOI：10．3724／SP．J．1088．201210832 研究论文：302～307 毛白杨环氧水解酶的异源表达及其在催化拆分 手性环氧化物中的应用 赵 晶，鞠 鑫 ，潘 江 ，李春秀 ，王敏杰 ，许建和 ， 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海200237 中国林业科学研究院林业研究所，北京 100091 摘要 ：对 已公布 的全基因组进行检索发现，杨树 (Populustomentosa)至少含有 24个预测为可溶性环氧水解酶的基 因．从 中选 取了7个可能的环氧水解酶基因进行克隆，通过扩增得到其 中5个毛 白杨 (PopulustomentosaCarr)环氧水解酶基 因．序列分 析显示，它们与 己克隆的巨大芽胞杆菌环氧水解酶的同源性仅为 24％～26％．对该系列基因进行了在E coli中的异源表达，并 将得到的5个环氧水解酶 (PTEHl～5)用于缩水甘油苯基醚和对硝基苯 乙烯氧化物的酶促水解反应．结果发现，其 中3个重组 酶具有显著的环氧水解酶活性．进一步研究表 明，PTEH1和 PTEH2对于缩水甘油苯基醚显示 了一定的反常规 的 )一选择性， 而PTEH5则优先水解 (．构型的缩水甘油苯基醚．因此，毛 白杨中环氧水解酶表现出多样性． 关键词：毛 白杨；环氧水解酶；异源表达；缩水甘油苯基醚；对硝基苯乙烯氧化物；催化拆分 中图分类号：O643 文献标识码：A 收稿 日期：2011-08．12．接受 日期：2011-09．26． 通讯联系人．电话：(021传真：(021电子信箱：jianhexu@ecust．edu．ca 基金来源：国家 自然科学基金 ；国家重点基础研究发展计划 (973计划，2009CB724706) Heter0geneOusExpressionofEpoxideHydrolaseGenesfrom PopulusTomentosa andApplicationOftheEnzymeforBiocatalyticResolutionofChiralEpoxides — ZHAOJing，JUXin，PANJiang，LIChunxiu，WANGMinjie，XUJianhe’ StateKeyLaboratoryofBioreactorEngineering,EastChinaUniversityofScienceandTechnology,Shanghai20023ZChina 2ResearchInstituteofForestry,ChineseAcademyofForestry,Be~ing100091，China Abstract：ThegenomeofPopulustomentosawasthefirsttobereportedintrees．Basedontheminingresultsofthedatabase，agenepool encoding24potentialsolubleepoxidehydrolaseswasproposed．Inwhich，7geneswereselectedinthisstudy,and5genesweresuccessfully clonedandseque