水溶性C60化合物与蛋白质相互作用的光谱研究.pdfVIP

第28卷，第10期 光谱学与光谱分析 、7r01．28，No．10，pp289—290 20o and 0ctober。2008 8年lo月 SpectroscopySpectralAnalysis 水溶性C砷化合物与蛋白质相互作用的光谱研究 张秀凤，舒春英，王春儒，向俊峰，唐亚林 中国科学院化学研究所，北京100190 摘要水溶性富勒烯因其在生物和医药领域有着很大潜在的应用价值，研究水溶性富勒烯纳米颗粒进入 人体后与蛋白质问的相互作用，特别是相互作用的模式和机制，对其在生物体内的应用具有重要意义。利用 荧光猝灭、荧光动力学、核磁共振、质谱、紫外吸收光谱、圆二色谱、红外光谱、x光电子能谱等手段研究了 水溶性富勒烯纳米颗粒与人血清蛋白之间的相互作用，提出水溶性富勒烯纳米颗粒与蛋白质问相互作用的 模式和机制：富勒烯纳米颗粒结合在人血清蛋白的IIA区域，富勒烯纳米颗粒与蛋白质结合以后使得蛋白的 旷螺旋的成分明显增加，表明富勒烯纳米颗粒可以使蛋白质的结构变得更加紧密。 关键词水溶性富勒烯；人血清蛋白；构象变化 中图分类号：0644．1文献标识码：A 文章编号：1000-0593(2008)lo—0289—02 富勒烯及其衍生物在生物医药领域引起科研工作者的广 由于人血清蛋白生物大分子的分子量比较大，在溶液中的运 泛关注，特别是水溶性富勒烯衍生物具有多方面的药理活 性，例如：抗病毒、抗滤过性病原体、抗氧化以及神经保护 作用，可以参与细胞信号转导以及细胞凋亡，还有望发展成 18．4 态和自由态TEMDP_CF分子之间快速的交换导致了d 为酶抑制剂和疾病诊断试剂。水溶性富勒烯衍生物经活体小 处的谱峰增宽现象。 鼠试验证明口服不仅没有急性毒性作用，而且还表现出不同 程度的生物相容性源于不同类型的水溶性基团。有机磷化合 量为：6802l，HSA的分子量为：66681，两者分子量的差正 物是一种和骨骼组织表面有很强亲和作用的生物活性物质， 好等于TE～mpCF的分子量l340，与通过XPS分析得到 在近20年时间里有机磷化合物在治疗骨骼疾病方面具有广 泛的应用价值。由于富勒烯引起了人们越来越浓厚的研究兴 1I)F实验中只出现了一个很强的C6。的谱峰，没有出现分子 趣，探究它与人血清蛋白的相互作用具有非常重要的意义。 离子峰，这与文献报道的其他水溶性富勒醇的实验结果一 本文采用生物物理的方法(包括31P．NMR、MmDI-T()F质 致，这是由于强的激光强度剥离了富勒烯笼上修饰的官能团 谱、紫外光谱、荧光光谱、荧光动力学、付利叶转换一红外光 谱和圆二色谱)研究了一种结构新颖的含有有机磷的水溶性 CF分子足够稳定，以致于能够被MAI，D卜TOF实验所检测。 富勒烯纳米颗粒(C6。瓯(0H)。(C(P03Et2)2)z(优≈8，，l≈TE肼CF与蛋白质的结合在引起蛋白质荧光发射峰 12，z≈1)，简称为：TEMDP-CF)与HsA的相互作用。本工强度猝灭的同时，发射峰的峰位随药物浓度的增加明显红 作对于目前备受关注的水溶性富勒烯纳米颗粒对于人血清蛋 移，说明色氨酸所处微环境发生了改变，引起蛋白质二级结 白二级和三级结构的影响具有重要的参考价值。 构发生变化。为了更好的理解TEMDP_CF对蛋白质构象的 NMR技术作为一种非常有效的手段在研究生物大分子 影响，我们利用了圆二色谱和红外光谱来对TEMDP-C卜 和药物小分子方面被广泛使用。TEMDP-cF在与HSA结合 前、后，TE衅CF的31P-NMR谱只在艿18．08处出现一个HSA的相互作用引起了HSA旷螺旋、p折叠结构百分含量 单峰，说明该样品中只有一种化合态的磷存在，归属于