RAS系统抑制剂对肾动脉狭窄合并动脉粥样硬化大鼠动脉斑块形成与进展的研究.pdfVIP

路，抑制肾纤维化。 质纤维化； RAS系统抑制剂对肾动脉狭窄合并动脉粥样硬化 大鼠动脉斑块形成与进展的研究 陈明1扬乔岚2郝炎2 1成都中医药大学附属医院肾内科2泸州医学院研究生 目的：肾动脉狭窄是由多种病因引起的一种肾血管疾病，其所引起的继发性病理 生理改变主要为肾血管性高血压和随着狭窄程度的加重引起的缺血性肾病。如今，动 脉粥样硬化性已成为肾动脉狭窄的首要病因。研究观察直接肾素抑制剂对肾动脉狭窄 合并动脉粥样硬化大鼠的主动脉斑块部位巨噬细胞标记抗原CD68、血管平滑肌细胞 从而为临床合理、有效选用抗高血压药物治疗动脉粥样硬化提供理论依据。方法： One l、动物模型的建立：将78只雄性SD大鼠随机分为一肾一夹(OneKidney One Clip，1Klc)组、二肾一夹(TwoKidney 采用平行针灸针缩窄法造成肾动脉狭窄，对照组则只暴露肾动脉，不做狭窄造模。行 手术前后均测量血压及体重，凡造模手术后血压比手术前高20mmHg(大于正常血压 值3个标准差)以上且高于I 15mmHg，视为手术成功者，对造模失败的大鼠进行淘汰 0％ [25]。二组大鼠与对照组均予各组大鼠均予注射VitD350万IU／kg并高脂饲养(1 分以下几部分进行试验： (I)禁食、禁饮8h后心脏采血，全自动生化分析仪检测血 甘油三酯、胆固醇，血肌酐，放射免疫法检测血浆肾素活性(PRA)；(2)游离并切 取SD大鼠主动脉及狭窄侧肾脏，将组织一部分石蜡包埋做HE染色(血管组织)和 (3)免疫组织化学法检测实验大鼠主 PAS染色(肾脏)；一部分一700C冷冻保存； 组主动脉石蜡切片，采用SABC法，PBS代替一抗作阴性对照，斑块区域出现棕黄色 plus6．0软件分析，比 MMP-I，2，9蛋自在斑块上的表达变化，图像采集后用Image—pro ．．240．． 较各组的平均光密度值； 表达变化：取冷冻保存的各组主动脉组织100mg研磨成粉状，提取蛋白后1000C沸水 中变性并检测蛋白浓度，上样后电泳，转膜，封闭，一抗4。c过夜，二抗室温孵育 2h，滴加发光液后凝胶成像仪照相后用Quangtityone软件分析目的条带和内参条带灰 度值，结果以比值表示，检测MMP2在各组大鼠动脉斑块中的表达变化。结果：1．采 射VitD3 P0．05，HE染色可见主动脉弓处管腔内斑块样改变，证明该法可有效建立肾动脉狭窄 K1 合并动脉粥样硬化大鼠动物模型。2、RAS系统抑制剂对1C及2KtC模型血压及生 化指标的影响。 (1)血压：阿利吉仑和厄贝沙坦都可降低1K1C及2K1C组血压， 2K1C组较为明显，两者在降压效果上比较无明显差异(P0．05)。(2)血脂：阿利 吉仑可明显降低1K1C及2KIC组血浆总胆固醇，分别与其生理盐水组比较， P0．05。厄贝沙坦则无明显降低血浆总胆固醇作用，这种差异在2K1C组更为明显， 见统计学意义(数据未显示) (3)血浆肌酐：1K1C及2K1C组与阴性对照组比较， 1K1C组血浆肌酐的降低作用不明显，对2KIC组血浆肌酐的降低作用较为明显，分 别与组内生理盐水组比较，均具统计学意义(P0．05)，其中，阿利吉仑作用优于厄 式组均显著降低，分别与生理盐水组及厄贝沙坦组比较，均有统计学差异(PO．05)。 3、 RAS系统抑制剂对1K1C及2K1C模型动脉粥样硬化形成与进展的影响。， (P0．05)，CD68及MMPl，2，9 吉仑组均较生理盐水组及厄贝沙坦组均显著降低(PO．05)；厄贝沙坦组与生理盐水 坦组及生理盐水组均表达显著下降(P0．05)，