蓝藻定向发酵产丁酸的条件研究.pdfVIP

蓝藻定向发酵产丁酸的条件研究 2阮文权1’2‘ 吕娴1’2严群L (1．江南大学环境与土木工程学院，江苏无锡214122；2．江南大学工业生物技术 教育部重点实验室，江苏无锡214122) 摘要通过厌氧发酵将其资源化已成为近年来规模化处置厌氧废弃物的主要方式。 本研究以四种有机酸(乳酸、乙酸、丙酸、丁酸)对厌氧颗粒污泥进行胁迫处理， 将胁迫后的污泥接种太湖蓝藻进行发酵产丁酸的实验，考察单一有机酸及混合有 机酸胁迫对提高蓝藻厌氧发酵产丁酸的影响。结果表明，采用乳酸浓度2g／L、乙 酸浓度6g／L、丙酸浓度5g／L和丁酸浓度12g／L的混合有机酸胁迫污泥后产丁 酸效果最佳，获得的最大丁酸产量为10252mg／L，比空白提高了139％。实验中还 对厌氧消化过程中蛋白酶活性的变化进行了测定，结果表明通过一定浓度的有机 酸胁迫污泥，可以提高微生物的耐酸能力，进而提高蛋白酶的活性，最终达到提 高丁酸产量的目的。 关键词有机酸胁迫丁酸蓝藻厌氧发酵蛋白酶 文章编号： 中图分类号： 文献标识码A 从20世纪30年代首次发现湖泊富营养化现象到现在，全世界已有30％一40％ 的湖泊和水库受到不同程度富营养化的影响n1。太湖这些年来也反复的经历着蓝藻 的大爆发，2007年的一次大规模爆发更是导致了无锡市的饮用水危机，蓝藻问题 也立刻成为全国范围内的关注焦点。然而，鉴于蓝藻中含有丰富的营养成分，因 此对其进行资源化利用，对解决蓝藻引起的环境问题具有十分重要的现实意义乜1。 其中，将蓝藻作为生物质原料进行厌氧发酵产氢产甲烷以及丁酸、乙酸有机酸等 是目前认为最可行资源化方式之一。 作为一种非常重要的工业原料，丁酸的应用领域非常广泛，可用于制造各类 丁酸酯类、丁酸纤维、清漆、药物、香料等，也用作乳化剂、杀菌剂和萃取剂∞1。 同时，由于在生物产氢过程中丁酸的积累有利于产氢，因此丁酸的生成对生物制 氢也具有指示作用∽1。目前，丁酸的工业化生产主要以化学合成法为主，这一过 程不仅造成环境污染，而且由于其原料石油供应的日益减少，因此通过生物发 基金项目：国家科技支撑计划项目(2009BAC52803)；国家自然科学基金项目 江苏省科技支撑项目(BE2008607)江南大学自主科研计划资助(J-USRP20906) 作者介绍：吕娴(1986-)，女，硕士研究生，主要从事固体废弃物资源化技术研究； 水阮文权(通讯作者)，E-real l：wqruan@jiangnan．edu．cn 0|。 酵法生产丁酸将会成为发展的主趋势n1 提高发酵法丁酸产量的一个重要因素就是降低大量积累的有机酸对微生物的 抑制作用，酸抑制会对细胞生理产生多种影响，包括破坏细胞膜、抑制多种酶和 转运系统的活性等n¨。研究表明厌氧发酵中的许多微生物都具有适应性应答 (adaptiveresponse)机制，即细胞受到适当剂量胁迫时，能够相应提高胁迫物 质的含量，以适应后期大剂量的损害n羽。 本实验是通过调节初始pH值对发酵起到定向产丁酸的作用，并通过单一有机 酸和混合有机酸对污泥进行胁迫，通过外界的酸胁迫作用能激活微生物的某些RNA tolerance 合成酶或DNA结合键调节因子的活性，产生酸应激(acid response，ATR) 效应，从而最终提高酸耐受性，旨在提高蓝藻发酵产物中丁酸的产量和在产物中 所占的比例。 1实验材料和方法 1．1实验材料 蓝藻取自太湖渤公岛蓝藻打捞处(表1)；厌氧颗粒污泥取自宜兴某柠檬酸厂。 颗粒污泥在接种前要先进行加热预处理及活化处理n3，H1：加热预处理是将颗粒污泥 热处理(121℃，15min)，以杀灭其中的产甲烷菌；活化是将热处理后的污泥在 COD5000 mg／L的葡萄糖溶液中培养一周，使污泥的活性恢复并加强，以达到较好 的发酵效果。 表1蓝藻和污泥的性质 Table1Characterizationofthe andanaerobic