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STR图谱分析方法用于细胞库中
人源细胞的鉴别研究
吴雪伶 冯建平 吴 瑜 樊金萍 孟淑芳 李德富
中国药品生物制品检定所细胞室——卫生部国家生物技术产品质量标准化重点实验室,北京,100050
摘要 目的采用STR图谱分析的方法,建立本单位细胞库中所有人源细胞的鉴别图谱,
并进行细胞交叉污染及细胞误判现状分析的研究。方法采用16个位点的STR图谱分析方
法,检测本单位细胞库中所有收集保存的及其他单位来源的共计61株人源细胞,并将STR图
谱检测结果与目前国际细胞库公布的数据进行比对,分析细胞的正确性及交叉污染情况。对
未检出信号的细胞株,采用同工酶法对细胞的种属进行鉴别。结果被检测的61株细胞中,41
株细胞呈现特征性STR图谱,不存在与其他细胞的交叉污染现象,其中36株细胞与ATCC
或JCRB保存的同一名称细胞在相应的9个STR位点的数据完全一致,5株细胞均仅在vwA
位点与ATCC数据不完全相同,可判定为正确细胞;7株细胞尚无国际可比对数据,但STR图
谱特异,可认定为新建细胞。11株细胞(占17.7%)被鉴定为错误的细胞,其中舌癌细胞
S3
细胞的数据完全一致;2株HuT一102的数据与ATCC的数据完全不同;4株细胞未检测到信
号,同丁酶结果显示均为鼠源细胞;同时还发现2株细胞为交叉污染细胞。结论细胞误判及
细胞交叉污染现象较为严重,正确鉴别细胞,特别是对国内自建细胞重新鉴定对保证科学研究
的可信性及可重复性极为重要。
关键词STR图谱;细胞库;细胞鉴别;交叉污染;细胞误用
细胞被广泛应用于基础生物学研究、生物制品 我室细胞库自1996年开始建立,多年来从不同
生产等领域,发挥着不可替代的作用。但长期以来, 来源收集了多株细胞,不仅包括科学研究用细胞,而
细胞交叉污染、细胞误判或误用的情况一直存在,近 且还包括多种生物制品检定用细胞。由于我国实验
年来已经引起了学术界的广泛关注fl。5J。随着细胞 细胞来源及使用较为混乱,对我室细胞库中收集的
鉴别技术的不断发展,特别是STR鉴别技术的发 所有人源细胞,按照国际发展的要求,重新进行鉴别
展,多个国际细胞保藏中心,如美国ATCC、日本研究,对保证细胞库细胞正确性极其重要。因此,在
我们前述工作的基础上mJ引,开展了对我室细胞库
JCRB、欧洲ECACC及德国DSMZ等均对各自保藏
的人源细胞开展了重新鉴定研究[6。8],发现多株误判 中保存的所有人源细胞及来自其他细胞保藏中心的
或误用细胞,而且多株细胞被重新定义L2’9。10|,同时, 部分人源细胞采用STR图谱技术重新进行了鉴别
各细胞中心将误判细胞在其网页上公布,大力呼吁 研究,以初步探讨我国细胞交叉污染及细胞误判的
研究者使用正确细胞。 现状。
tandem
短串联重复序列(Short repeat,STR)
材料和方法
由于其具有高度特异性及多态性,使得STR图谱检
测方法能够成功应用于人源细胞的鉴别工作[1¨,由 1.细胞待检的42种61株细胞分别来自5个
于它可以赋予每一种人源细胞特定的身份证明,因 细胞库(见表1),其中41株为我室细胞库(A)保存,
此为科研及生产用细胞的准确性提供了有力保障。 9株来自武汉细胞库(B),6株来自上海细胞库(C),
4株来自沙东生物公司细胞库(D),1株来自第四军
基金项目:国家科技支撑计划。生物制品安全性评价技术及原辅 医大学细胞库(E)。
料安全性研究一生物制品生产用细胞基质安全性研究”
(
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