GB 4789.34-2012食品安全国家标准　食品微生物学检验　双歧杆菌的鉴定.pdf

中华人民共和国国家标准 GB 4789.34—2012 食品安全国家标准 食品微生物学检验 双歧杆菌的鉴定 2012-05-17 发布 2012-07-17 实施 中华人民共和国卫生部 发布 GB 4789.34—2012 前 言 本标准代替GB/T 4789.34-2008 《食品卫生微生物学检验 双歧杆菌检验》。 本标准与GB/T 4789.34-2008 相比，主要变化如下： ——修改了标准的中文名称； ——修改了培养基和试剂； ——删除了果糖-6-磷酸盐磷酸酮酶（F6PPK）测定和双歧杆菌的计数方法。 I GB 4789.34—2012 食品安全国家标准 食品微生物学检验 双歧杆菌的鉴定 1 范围 本标准规定了食品中双歧杆菌（Bifidobacterium ）的鉴定方法。 本标准适用于食品中双歧杆菌的鉴定。 2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a） 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃； b） 气相色谱仪配FID 检测器； c） 冰箱：2 ℃～5 ℃； d） 天平： 感量0.1 g； e） 无菌试管：18 mm×180 mm、15 mm×100 mm； f） 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器（200 μL～1000 μL） 及配套吸头； g） 无菌锥形瓶：500 mL、250 mL。 3 培养基和试剂 3.1 双歧杆菌培养基：见附录A 中的A.1。 3.2 PYG 液体培养基：见附录A 中的A.2。 3.3 甲醇：分析纯。 3.4 三氯甲烷：分析纯。 3.5 硫酸：分析纯（体积比）。 3.6 冰乙酸：分析纯（体积比）。 3.7 乳酸：分析纯。 3.8 乙酸标准溶液：吸取分析纯冰乙酸5.7 mL，移入100 mL容量瓶中，加水至刻度，标定，标定方法见附 录B，此溶液浓度约为1 mol/L。 3.9 乙酸标准使用液：将经标定的乙酸标准溶液用水稀释至0.01 mol/L。 3.10 乳酸标准溶液：吸取分析纯乳酸8.4 mL，移入100 mL容量瓶中，加水至刻度，标定，标定方法见附 录B，此溶液浓度约为1 mol/L。 3.11 乳酸标准使用液：将经标定的乳酸标准溶液用水稀释至0.01 mol/L。 1 GB 4789.34—2012 4 鉴定程序 双歧杆菌鉴定程序见图1。 样品25 g（mL）+225 mL 灭菌生理盐水 10 倍系列稀释 选择2 个～3 个适当稀释度，各取0.1 mL 分别加入到双歧杆菌琼脂平板进行涂布 厌氧，48 h 36 ℃±1 ℃ 挑取菌落接种于双歧杆菌琼脂平板 厌氧，48 h 36 ℃±1 ℃