副猪嗜血杆菌血清5型间接血凝试验和间接ELISA抗体检测方法的建立.pdfVIP

维普资讯 中国兽 医科学 2007，37(11)：964—968 VeterinaryScienceinChina 中图分类号 ：S852．612：R446．61 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673—4696(2007)11-0964—05 副猪嗜血杆菌血清 5型间接血凝试验和间接 ELISA 抗体检测方法的建立 石 碧 ，崔耀文 ，贾 凡 ，金 卉 ，万 云 ，蔡旭旺 ，方 刚 ，陈焕春 ，周 锐 (1．华中农业大学 动物医学院农业微生物学 国家重点实验室，湖北 武汉 430070； 2．武汉水产科学研究所 ，湖北 武汉 430065) 摘要：为建立副猪嗜血杆菌(HPS)的血清学诊断方法，通过探索 HPS荚膜多糖产生的最适体外培养条 件 ，提取 了HPS血清 5型菌株的荚膜多糖 (CPS)，并以之为抗原分别建立 了间接血凝试验 (IHA)和 间接 EIIsA两种抗体检测方法 ，对其特异性 、敏感性和符合率进行 了比较研究。结果表 明，两种检测方法的特异 性 良好 ，但 ELISA 的敏感性是 IHA 的 5～ 10倍，二者的阳性符合率、阴性符合 率和 总符合率分别为 79．7 、55．2 和 65．3 。用这两种方法检测 了320份 临床送检猪血清，IHA 和 ELISA 的阳性率分别为 4O 和 59 。结果证 实，这两种方法适用于不同实验室条件下 HPS的诊断和流行病学调查。 关键词：副猪嗜血杆菌；荚膜 多糖 ；间接血凝试验；间接 ELISA Establishmentofindirecthaemagglutinationand indirectELISA assays fordetectionofantibodiesagainstHaemophilusparasuisserotype5 SHIBi，CUIYao—wen ，JIA Fan ，JIN Hui，WAN Yun ，CAIXu—wang ， FANG Gang ，CHEN Huan-chun ，ZHOU Rui (1．StateKeyLaboratoryofAgriculturalMicrobiology／CollegeofVeterinaryMedicine，HuazhongAgricultural University，Wuhan430070，China；2．WuhanInstituteofAquaticScience，Wuhan430065，China) Abstract：Indirecthaemagglutination assay and EIISA weredeveloped to detectantibodiesagainst Haemophilusparasuis(HPS)serotype5inserum．Capsularpolysaccharide(CPS)waspivotalinantigeni— cityanddiagnosisHPS．ThecapacityofHPS serotype5togenerateCPSinvitrowasoptimized．TheCPS waspurifiedfrom theHPSserotype5culture．IHA andEIISA fordetectionoftheantibodiesagainstHPS serotype5weredevelopedusingthepurifiedCPSasantigen．Thespecificity，sensitivityandconcordanceof IHA andEIISA werecompared．Both assayshadhigh specificity：butthesensitivity ofELISA wasap— proximately5— 10timesthatofIHA．Theconcordanceforthepositive，negativeandoverallincidencebe— tweenIHA andELISA were79．7 ，55．2 and 65．3 ，respectively．Of320porcineserateste