IL-1β在AML中的表达及功能的初步研究.pdf

IL,-lp在AML中的表达及功能的初步研究 中文摘要 中文摘要 参与炎症反应、自身性免疫疾病和白血病的发生过程。本论文拟对其在急性髓系 白血病(AML)中的功能进行初步研究，并制备鼠抗人IL．1p的单克隆抗体。 Green 对AML细胞增殖的影响。其次，我们应用SYBRI实时荧光定量PCR技术 检测不同分期AML病人骨髓标本中IL．1p的表达差异。最后，我们通过构建的原 核表达质粒pET-32a(+)．IL．1p，在大肠杆菌BL21(DE3Lysis)中诱导表达重组蛋 白，应用纯化的融合蛋白免疫BALB／e小鼠，并制备鼠抗人IL．1B的单克隆抗体。 IL．1B。成功构建了真核表达质粒pEGFP．C1．IL．1D，并以此转染K562细胞，结果 原核表达质粒pET-32a(+)．IL．1p，在大肠杆菌BL21(DE3Lysis)中诱导表达重组 蛋白，应用纯化的融合蛋白免疫BALB／c小鼠，制备了2株能稳定分泌抗人IL．1p 的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。 病人骨髓细胞中IL．1p的表达量较粒细胞白血病未分化型(M1)、粒细胞白血病 抗体，并成功应用于Western blot和流式细胞术检测IL．1D的表达。 关键词：IL．1 B，AML，Real-time．PCR，单克隆抗体 作 者：刘佳佳 指导老师：王明华(副教授) 刘海燕(教授) oflL-·linadultAML The andfuction expression p Abstract in the Interleukin-1 a thathumansencoded Objective beta(IL一113)isprotein by lL一1B totheIL-1 is belongs family(IL—la，IL—lp，IL·1Ra)．IL-lpprecursor gene．IL-1B cleaved 1 intothematureform．The molecularis31 the byCaspase precursor KD，and in molecularofmatureformis17KD．IL-l all role diseases， pplaysimportantmany diseasesandleukemia．Thisresearchis such铀inflammatoryresponses，auto—immune anti-humanIL一1 to theroleofIL-1inAMLandto mouse