应用酵母双杂交法筛选LOH12CR1互作蛋白.pdfVIP

亟±堂焦诠塞 虫塞擅墓 摘要 PJ综合征(Peutz—JeghersSyndrome)是一种常染色体显性遗传病， 以口唇，颊部黑斑，胃肠道多发错构瘤样息肉为主要特征，并与胃肠 道、胰腺、卵巢等多种良、恶性肿瘤相关。该病被认为是STKll(又 名LKBl)基因突变所致，编码一种丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶。目前己 明确STKl1／LKBl的作用底物，细胞中过表达的STKl1／LKBl能使细 胞阻滞在G1期，表明STKll／LKBl可能作为抑癌基因发挥功能。 目前经研究证实STKl1／LKBl主要的生理功能包括：参与维持细 胞极性，细胞周期阻滞作用及促进细胞凋亡，调节细胞能量代谢，调 节胚胎发育与信号转导，抑制肿瘤细胞增殖。对于STKll／LKBl功能 认识在很大程度上是由于其互作蛋白的发现，STKll／LKBl可能通过 与蛋白的相互作用而从多个路径参与细胞的生理过程。LOHl2CRl Pull 为本课题组应用GST down技术和免疫共沉淀实验筛选并验证了 1／LKB STKl l新的功能未知的互作蛋白，此蛋白位于12号染色体短 臂，其所在区域在造血系统恶性肿瘤及卵巢、乳腺、肺等肿瘤中常有 杂合子缺失现象。先前的研究证实LOHl2CRl在多种组织中广泛表 高度同源，提示其是一个具有重要功能的蛋白，并且该蛋白与鸟嘌呤 核苷酸交换因子TRIO的spectrin 一定的同源性。激光共聚焦显微镜下显示LOHl2C对呈粗斑点状散 布于胞浆之中，仅少数定位于胞核，并发现过表达的LOHl2C刚能 1／LKBl 够有效抑制细胞生长和增殖的作用，这种作用不依赖于STKl 内源性的表达。为进一步明确STKl 上是否具有协同作用，以及二者的互作是否需要辅助蛋白的参与，本 GoldYeast Two．Hybrid 为进一步深化对STKl 1／LKBl与LOHl2CR互作机制提供基础。 1／LKBl；LOHl2CRl；互作蛋白； 关键词Peutz．Jegher综合征；STKl 酵母双杂交 II T ABSTRAC isanautosomal inherited Peutz—JeghersSyndrome dominantly diseasecharacterized maculesonthe and bymelanocytic lips，perioral buccal and mostofwhichare regionsbymultiplegastrointestinalpolyps with hamartomatous isassociated syndrome type．Furthermore，this and oftheintestinal tract，the benignmalignantneoplasms