单核苷酸多态性与先天性室间隔缺损相关性的初步的研究.pdf

单核苷酸多态性与先天性室间隔缺损相关性的初步研究 中文摘要 单核苷酸多态性与先天性室间隔缺损相关性的初步研究 中文摘要 目的：本实验以先天性室间隔缺损（Ventricular septal defect ，VSD ）患者为研究 对象，以正常儿童为对照，从基因遗传和环境因素两方面着手探讨先天性心脏病 (Congenital Heart Disease, CHD)致病因素，为CHD 的病因研究及预防提供参考。 方法：运用PCR-DNA 测序技术对43 例VSD 患者及188 例正常儿童进行NKX2-5 外显子1 的测序，运用SNaPshot 基因分型技术分别检测43 例VSD 患者及188 例正 常儿童叶酸代谢通路上 11 个酶基因的 13 个单核苷酸多态位点 （single nucleotide polymorphisms ，SNP ），同时对CHD 患者和正常儿童的父母进行访谈式的关于CHD 相关危险因素的问卷调查，共完成116 例患者和161 例正常对照的有效问卷，并对结 果进行统计分析。 结果： 1 对43 个VSD 样本和 188 个正常样本进行NKX2-5 外显子1 测序，结果未发现 任何基因突变，找到 1 个已报道的SNP 位点，c.63A ＞G，其两组间基因型分布及等 位基因频率无统计学差异，P ＞0.05 。 2 在43 个VSD 样本和 188 个正常样本中， MTHFD-G878A 仅检测到野生型， 未检测到突变。CBS-C699T 仅检测到野生型(-/-)和杂合突变型(-/+) 。其余11 个位点皆 检测到三种基因型：野生型(-/-) 、杂合突变型(-/+)和纯合突变型(+/+) 。VSD 组和对照 组比较显示：VSD 组携带 RFC1-G80A 的 AA 基因型频率(39.5%)显著高于对照组 (27.7%),P0.05,OR=4.47,95%CI=[1.60,12.48] ；VSD 组中DHFR-c594+59del19 的GG 基因型在VSD 和对照组中的分布频率分别为 34.9%和 45.2% ，前者显著低于后者， P0.05 ，OR=0.39，95%CI=[0.15,0.98]。其他位点的杂合突变或纯合突变在VSD 和正 常对照组中的频率分布无显著差异，P ＞0.05 。 3 对CHD 患儿是否存在父系或母系先天性心脏病家族史和患儿母亲怀孕早期有 无感冒、孕期有无吸烟或被动吸烟等相关因素(变量)进行二值Logistic 回归分析，孕 I 中文摘要 单核苷酸多态性与先天性室间隔缺损相关性的初步研究 早期有无感冒（B=-0.988 ，Wald=9.463 ，P=0.002 ）、母亲家系中是否有 CHD 患者 （B=-2.423 ，Wald=8.780 ，P=0.003 ）、父亲家系中是否有 CHD 患者（B=-2.355 ， Wald=4.180 ，P=0.041 ）三个变量与CHD 的发生有关。 结论： 1 NKX2-5 外显子1 测序未发现基因突变。NKX2-5 外显子1 上的c.63A＞G SNP 位点与VSD 之间无明显相关。 2 RFC1-G80A 的AA 基因型构成VSD 的独立风险因素，而DHFRC-594+59DEL19 纯合缺失可能是VSD 发生的保护因素。 3 CHD是以遗传因素为主导的多基因遗传病。孕早期是胎儿心脏发育的关键时 期，孕早期感冒可能引起CHD 的发生，加强孕早期保健防护，对预防CHD发生具有 重要现实意义。 关键词：先天性心脏病；室间隔缺损；单核苷酸多态性；NKX2-5；SNaPshot 基 因分型；叶酸代谢；酶；危险因素 作 者：王 波 指导老师：严文华