菝葜及其活性成分白藜芦醇的降尿酸作用研究.pdfVIP

菝葜及其活性成分白藜芦醇的降尿酸作用研究 * 陈旅翼 ，邓旭坤，林亲雄 （中南民族大学药学院湖北 武汉430074 ） [摘要] 目的 寻找菝葜降尿酸的有效部位及活性成分，并初步阐述其降尿酸机理。方法 小鼠氧嗪酸钾造模， 筛选菝葜有效部位；体外黄嘌呤氧化酶（XO）抑制试验，测定白藜芦醇对XO的抑制率；大鼠果糖造模初步 阐明乙酸乙酯部位与白藜芦醇的降尿酸机理。结果 菝葜的降尿酸有效部位为乙酸乙酯部位，白藜芦醇体内 外均具有较好的抑制黄嘌呤氧化酶活性（IC50=47.53，in vitro），白藜芦醇是菝葜降尿酸的活性成分之 一，其机理可能是抑制XO活性，而菝葜是通过抑制XO与促进尿酸排泄的双重作用。结论 菝葜与其活性成 分白藜芦醇有明显的降尿酸作用。 [关键词] 菝葜；白藜芦醇；尿酸；高尿酸 现有的降尿酸制剂包括促尿酸排泄制剂，黄嘌呤氧化酶抑制剂和尿酸酶制剂[1]，但是它 们都有一些不尽人意的毒副作用，限制了其使用范围，如骨抑制，胃肠道紊乱，肾毒，过敏 综合症等[2-4]。高尿酸合并的肾功能紊乱的代谢综合症中，如何既降尿酸又能保护肾功能一 直是现代药物治疗的极大挑战。现代流行病学也表明高尿酸可能是引起肾功能紊乱的一个重 要因素[5]。因此，寻找既能降尿酸有能保护肾功能的药物就显得尤为迫切。 菝葜属于百合科的，别名又叫“金刚藤”。在中国已经有 1000 余年的用药历史，主要 用于治疗梅毒、急性细菌性痢疾、慢性间质性肾炎、肿瘤和痛风[6,7]。根据文献报道[8,9]：芪 类，黄酮类和皂苷类是其主要成分。菝葜治疗痛风主要源于临床报道，至于什么部位，什么 成分起效及作用机理如何，研究报道尚少。因此，本实验通过体内与体外模型，对菝葜进行 药理研究，寻找其有效部位及活性成分，并阐述其作用机制。 1. 实验材料 1.1 试药 菝葜粗根购于南京先声药店，经自我鉴定为百合科菝葜（Smilax china L.），标本存于 本实验室。1kg 菝葜药材，粉碎过 40目筛，于乙醇中浸泡 6天，过滤，减压回收得 120g 粗 浸膏（12%，W/W）。粗浸膏用适量热水溶解后，分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃 取至无色，分别得石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位与母液。白藜芦醇购 于南京中药研究所，经 HPLC 归一法，纯度大于 98%。 1.2 试剂 石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、磷酸（分析纯）与甲醇（色谱纯）购于南京汉邦化 学试剂公司。别嘌醇、黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶购于 Sigma 公司。氧嗪酸钾购于 Aldrich Chemical 公司。黄嘌呤氧化酶、尿酸、肌酐与尿素氮试剂盒购于南京建成生物公司。其它 试剂均为分析纯级。 1.3 动物 雄性 ICR 小鼠（18-22g）；雄性 SD 大鼠（180-220g），均购于湖北省疾病预防控制中心。 2. 实验方法 2.1小鼠造模与给药 小鼠随机分成 9 组，每组 10 只，给药组分别灌胃给予乙醇提取物（1 g/kg）、石油醚部 位（80 mg/kg）、氯仿部位 （160 mg/kg）、乙酸乙酯部位（250 mg/kg）、正丁醇部位（480 mg/kg）、 600 母液（110 mg/kg）与别嘌醇（10 mg/kg），空白组与模型组灌胃给予 0.3%CMC-Na 溶液。所 有试药均溶于 0.3%CMC-Na 溶液中。每天给药一次，连续给药三天，于末次给药前 1 h 腹腔 注射氧嗪酸钾溶液（250 mg/kg）。 2.3 大鼠造模与给药 大鼠随机分成 7 组，每组 7 只。除空白组给予自来水外，其它组均给予 10%的果糖水溶 液，连续 8周。4 周后，给药组分别灌胃给予乙酸乙酯部位（125 mg/kg与 250 mg/kg），白 藜芦醇（18.75 mg/kg与37.5 mg/kg）和别嘌醇（4 mg/kg）。对照组灌胃给予等体积的生理 盐水。 2.4 样品采集 血液样品通过眼眶采血，至于室温 1 h 后，2500转离心 10 min 的血清；24 h 尿液通过 代谢笼收集，2000 转离心 10 min，留上清液；大鼠处死后，取肝脏适量，9 倍体积生理盐 水匀浆，3000 转离心10 min，留上清液。 2.5 尿酸、肌酐、尿素