Topo+I在人病理性瘢痕组织中表达及羟基喜树碱对人病理性瘢痕成纤维细胞作用.pdfVIP

摘要 摘 要 目的：病理性瘢痕的防治是医学领域的重要课题，本研究通过比较病理性瘢痕 I特 与正常皮肤组织中DNA拓扑异构酶I(TopoI)是否存在差异，探讨Topo 胞增殖的影响，细胞周期的影响及其对细胞凋亡的诱导作用，以期了解HCPT 对成纤维细胞的药理作用。 例，女性6例：病程在烧伤创面愈合后6--．-9个月，在此期间没有接受过针对瘢 痕的各种治疗)；同一病人多余的正常皮肤组织标本21例作为对照组；采用免 疫组化的方法检测拓扑异构酶I的表达。(2)体外培养人病理性瘢痕成纤维细 小时，72小时3个时间段，采用MTT法检测羟基喜树碱对成纤维细胞生长的 抑制作用。2)采用流式细胞仪定量检测羟基喜树碱5个药物浓度(31，63，125， 250，500ng／m1)处理24h后成纤维细胞细胞周期的改变及凋亡的百分率。 对病理性瘢痕成纤维细胞凋亡的诱导作用。 结果：(1)Topoi在人病理性瘢痕和正常皮肤组织的角质形成细胞，成纤维细 胞中均有表达。正常皮肤中，角质形成细胞及成纤维细胞各有3例免疫组化阳 性；病理性瘢痕组织中，角质形成细胞及成纤维细胞各有7例和12例呈阳性。 正常皮肤角质形成细胞Topoi阳性表达率为14．3％，病理性瘢痕组织表达率为 I阳性表达率 33．3％，差异无明显不同(P=0．1473)；正常皮肤成纤维细胞Topo 1)羟基喜树碱对成纤维细胞的增殖有明显抑制作用，并且有明显的剂量依赖性 S期细胞增多，并且能诱导人病理性瘢痕成纤维细胞产生凋亡，在作用时间为 24小时，药物浓度达到250ng／ml时，细胞可出现明显的凋亡峰，成纤维细胞随 羟基喜树碱药物浓度增加而凋亡增加。3)500ng／ml羟基喜树碱药物干预成纤维 细胞24小时后，提取出来的DNA经过1％琼脂糖凝胶电泳，呈现为细胞凋亡 后特异梯状条带。 摘要 结论：在病理性瘢痕组织成纤维细胞中，拓扑异构酶I的表达明显高于正常皮 肤成纤维细胞；羟基喜树碱能够抑制体外培养的人病理性瘢痕成纤维细胞的增 殖，使S期细胞增多，能诱导成纤维细胞产生凋亡，且随羟基喜树碱药物浓度 增加而凋亡增加。 关键词： 羟基喜树碱；成纤维细胞；拓扑异构酶I；病理性瘢痕 Abstract Abstract Goal：Thereisasubstantialinterestin and scar． preventingtreatingpathological Our is at the effectof study aiming understandingpharmacological fibroblasts thedifferencein hydroxycamptothecin(HCPT)onbydetermining Topoi between SCarandnormalskintissueand theeffect expressionpathological identifying ofHCPTonthe andcell offibroblastsfrom proliferation，apoptosiscycleregulation SCar． pathological 1 SCar were takenfrom 5 Methods：(1)2 samples