海洋芽孢杆菌碱性酯酶BSE-1的纯化与性质研究 Purification of an alkaline esterase BSE-1 from marine Bacillus sp. and its characterization.pdfVIP

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2017-09-03 发布于湖北
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海洋芽孢杆菌碱性酯酶BSE-1的纯化与性质研究 Purification of an alkaline esterase BSE-1 from marine Bacillus sp. and its characterization.pdf

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高技术通讯年第卷第期： 2009 19 12 1316 ~ 1320 ： doi 10 .3772/ . issn . 1002-0470 .2009 . 12 .019 海洋芽孢杆菌碱性酯酶BSE-1 的纯化与性质研究! ＠ ! ＠高强王跃军于建生孙谧郑鸿飞（中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛266071） ! （青岛科技大学化工学院青岛266042）摘要海洋芽孢杆菌酯酶发酵液通过低温高速离心（，，）、乙醇硫 10000r/ min 30min 4 C - 酸铵双水相沉淀和O-Sepharose HR 阴离子交换层析等技术进行了纯化，最终得到电泳纯的酯酶BSE-1。SDS电泳结果表明，该酶表观分子量为30kDa。以对硝基苯磷酸酯（）为底物对进行了理化性质研究，结果表明，的最适反应温度为， PNPP BSE-1 BSE-1 60C 最适值为，为嗜热碱性酯酶；该酶在以下、范围内具有良好的热稳 pH 10 .0 60C pH 7 ~ 11 + 2 + 定性；与常见酸根离子、有机溶剂的配伍性较好，但金属离子对酶活影响较大，、、 Li Mg 2 + 2 + 2 + 3 + + 2 + 对有激活作用，的使酶活提高倍以上；、、、对 Ca BSE-1 1mmoI/ L Ca 2 Ba Fe Ag Sr 有抑制作用， 2 + 存在下酶活仅能保持左右。 BSE-1 1mmoI/ L Ba 10 % 关键词海洋芽孢杆菌，碱性酯酶，双水相沉淀，热稳定性 0 引言 1 材料和方法海洋中蕴藏着丰富的微生物资源，海洋微生物 1 . 1 菌种和培养基作为获得活性物质的新来源，正日益为国内外海洋菌种：海洋芽胞杆菌，由黄海水产研究所产物资［］ 1 研究工作者所重视。近年来有关海洋微生物源与酶工程室分离保藏。 20 产生新型生物酶的报道逐渐增多，海洋微生物已成培养基和培养条件：液体培养基（