几丁质酶抑制剂筛选模型建立及应用.pdfVIP

几丁质酶抑制剂筛选模型的建立及应用 刘明艳，张洪斌，胡雪芹，方明月 (合肥工业大学化工学院制药工程系安徽AJ犯230009) 摘要：目的建立几丁质酶抑制菌种的筛选模型，并以此模型进行抑制剂筛选。方法建立平 板透明圈初筛方法和DNS Lt色复筛方法；并用此筛选模型x中200株菌进行初筛和32株菌进行复筛。 结果通过对筛选条件进行优化，建立了可靠的筛选模型，并对200株菌进行粗筛，发现了32株活 性菌，继续对32个活性菌株进行复筛，最终得至-UIO株最优菌种，并证明均有强抑制几丁质酶的生 物活性。结论建立几丁质酶抑制菌种的筛选模型具有快速、微量、准确的特点，为生产生物农 药奠定了重要的物质基础。 关键词：几丁质酶；抑制剂；筛选模型 Establishmentand ofa for ApplicationScreeningAssay ChitinaseesanitihC(tibihnI Inhibitor LIU Ming-yan,ZHONGHong-bin’，HUXue-qin,FANGMing-yue (DepartmentofPharmaceuticalEngineering，HefeiUniversityofTechnology，Hefei230009，Claim) ABSTRACT：0B。珏【CTIVETOestablishall forchitinaseinhibitor assay screenng．M【ETHoDS 1r11e ofchitinasewas a methodswhichwereusedto activity assayedbyringtransparentplatescreening screen200strainsand DNScolorimetricmethodofrehabilitationwhichWasusedtoscreen32 screening strains．RESULTSTheeffectiveandreliable methodWasestablished．Thebestl 0strains screening wereidentifiedfrom200strains．whichwere tohave chitinase proved strong inhibitorybiological This micro-detectiveandaccⅦ．a：te activity．CoNCLUSIoNreproducible highthroughput screening beusedasatoolin the ofchitinaseinhibitors． assaymay investigation 1蚀Y model WoRDS：chitinase；inhibitors：screening 几丁质酶广泛存在于各种微生物、动物和植物中，尤其在真菌和昆虫等的生长、繁殖和发育 过程中起着重要作用IlJ，因此以昆虫几丁质酶作为标靶筛选得到的几丁质酶抑制剂通过抑制几丁 质酶的活性，从而能抑制昆虫的蜕皮和幼年昆虫的生长发育，而且由于几丁质不存在于脊椎动物 中，因而该类药剂对人畜较为安全，因此几丁质酶抑制剂可以开发成为一种新型的绿色生物杀虫 argadinN)等天然化合物，因为它们都是属于在纳摩尔浓度下就能有效发挥抑制作用的酶抑制剂。 随着组合化学和