茶树扦插生根过程中主要生化物质变化及POD57基因克隆和表达特征研究.pdfVIP

摘 要 茶树是一种重要的经济作物，目前主要采用短穗扦插方式进行繁殖，扦插苗成 活率的高低受内因和外因的影响。内因包括扦插材料和扦插时间；外因包括促根物 质、扦插基质、和环境条件等。 实验以皖茶91、舒茶早、石佛翠当年生半木质化枝条为材料，研究不同激素处 理对扦插成活率的影响；追踪扦插生根过程中生理生化指标的动态变化，分析这些 指标与扦插生根的关系；对过氧化物酶基因POD57 的分子生物学特性进行研究。旨 在为提高茶树扦插成活率提供技术和理论支持。实验结果如下: 1．三个品种茶树扦插成活率排序为皖茶91 ﹥舒茶早﹥石佛翠。外源激素抑制植 株生长，促进愈伤组织的生长；激素处理对皖茶91 扦插成活率改变不大，舒茶早最 适激素使用浓度为IBA200mg/L，石佛翠最佳处理为国光生根粉1000mg/L。 2 ．扦插生根过程中，含水率呈下降→上升趋势，水分含量变化表现出与扦插生 根有一定相关性，但不显著；石佛翠含水率最低，扦插成活率也低。可溶性糖含量 变化叶片中呈上升趋势，茎中呈上升→下降趋势；茎中淀粉含量皖茶91 先上升后下 降再上升，舒茶早和石佛翠呈下降→上升趋势；扦插前母叶内的可溶性糖与扦插生 根呈正相关。可溶性蛋白呈下降趋势，品种间差异显著，但没有表现出与扦插生根 显著的相关性。PPO 和IAAO 活性也与扦插生根有一定相关性，皖茶91 的 PPO 和 IAAO 活性在扦插20d 内较高，成活率较高，而舒茶早和石佛翠两种酶活性较低，成 活率也较低。POD 活性与扦插生根呈显著负相关。整个生根期间皖茶91 茶多酚含量 高于舒茶早和石佛翠，茶多酚含量与扦插生根呈一定的正相关。插穗经激素处理后， 短期内叶片和茎的含水率、可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白、茶多酚含量上升；POD 、 PPO 和IAAO 活性下降。三个品种各生理指标除POD 以外变化规律相似。 3 ．从茶树全器官转录组文库中筛选出POD57 的EST 片段，以茶树叶片为试验 材料，通过 RACE 技术克隆得到该基因 cDNA 全长序列为 1273bp，包含一个长为 957bp 的开放阅读框，编码318 个氨基酸，存在一定的内部跨膜结构。组织特异性分 析表明，该基因主要在根中表达。 4 ．定量PCR 分析生根期间POD57 表达量，结果表明皖茶91 和舒茶早表达量 呈下调→上调的趋势，石佛翠表达量呈上调趋势；插穗经激素处理后，0-20d 内POD57 表达量下降，三个品种均表现出下调→上调的趋势。石佛翠生根各时期表达量均高 于皖茶91 和舒茶早。 关键词：茶树、外源激素、扦插生根、生理生化、POD57 、基因克隆、定量PCR I Abstract Tea plant is a kind of important cash crop. Single node cutting of tea plant is current main propagation technology. The survival rate of cuttings was affected by internal and external factors. The internal factors include cutting materials and cutting time and the external causes include materiasl that promote rooting, cutting medium, environmental conditions and so on. The effect of different exogenous hormones on cutting survival rate was studied with one-year-old and semi-woody branches of the the Camellia sinensis cv.“ Wancha91”, Camellia sinensis cv.“Shuchazao”and Camellia sinensis cv.“Shifocui”. The dynamic changes of rel