离子色谱-脉冲安培法检测合成反应液中的果糖胺.docVIP

离子色谱-脉冲安培法检测合成反应液中的果糖胺 摘要：建立了以阴离子交换分离机理，脉冲安培检测合成反应液中果糖胺的方法。在0.02-20 mg·L-1范围内具有良好的线性，检测限可达1 μg·L-1。实际样品测定的相对标准偏差均小于3%，加标回收率在93.1%和103.4%之间。该方法检测合成反应液中果糖胺具有操作简便、干扰少、灵敏度高等优势，适用于合成工业中过程产物的监控。 关键词 离子色谱；脉冲安培检测；合成反应液；果糖胺 一、引言 果糖胺是Maillard反应的重要中间体。Maillard反应过程十分复杂，一般是由还原糖与氨基化合物先缩合生成葡萄糖胺，再经分子重排生成果糖胺，再与葡萄糖作用生成双果糖胺。 而双果糖胺不稳定，易失去一个果糖分子经结构重排重新生成果糖胺。而果糖胺则再经过 Amadori、Heinz分子重排及Strecker降解等反应进一步生成其它杂环类化合物[1]。因此对于涉及Maillard反应的合成体系，中间体果糖胺的测定显得至关重要。 目前果糖胺的主要测定方法为NBT比色法[2]，以及以比色法为基础的试剂盒法，操作非常快捷，但检测灵敏度低。同时，当检测体系中存在抗坏血酸、酚磺乙胺[3]等时，这些物质会对果糖胺测定存在干扰，结果误差很大。离子色谱法借助于色谱柱的分离手段从而有效排除共存物的干扰，并且安培检测法具有更高的灵敏度，具有明显优势。目前，离子色谱法检测果糖胺在国内外文献中均未见到报道。 二、实验部分 2.1 仪器和试剂 ICS-3000型离子色谱仪（Dionex，美国）：四元梯度泵；ED3000电化学检测器，包括 Au工作电极，Ti对电极，pH/Ag/AgCl复合参比电极；AS自动进样器；Chromeleon 6.80色 谱工作站 Milli-Q Advantage A10超纯水机(Millipore，美国)；0.22 μm微孔尼龙膜（希波氏，天津富集）；OnGuardⅡ RP固相萃取小柱（Dionex，美国）； 果糖胺标准储备液1000 mg/L：由果糖胺（≥98%，Fluka）配制在20 mg·L-1叠氮化钠水溶液中。 2.2测定条件 分析柱：CarboPac PA1，250×2 mm； 保护柱：CarboPac PA1，50×2 mm； 淋洗液条件：0-7 min，40 mM NaOH；7-14min，40 mM NaOH，0-200mM NaOAc；14.1-16min，200 mM NaOH；，16.1-25，40 mM NaOH。 流速：0.25 mL/min ；进样方式：自动进样，25 μL ；柱温及检测器温度：30 ℃； ED 3000积分脉冲安培检测：Au工作电极电极，Ag/AgCl参比电极模式，糖四电位波形。 三、 结果与讨论 3.1 标准曲线和方法检出限 以峰高为研究对象，果糖胺在0.02-20 mg·L-1浓度范围内具有良好的线性，相关系数为0.9998。根据3倍信噪比可计算出果糖胺的检出限为1 μg·L-1。 3.2 样品测试 样品反应液用含有20 mg·L-1叠氮化钠水溶液稀释10倍，摇匀后使液体通过0.22 μm尼龙膜和OnGuard II RP柱，弃去初始3 mL流出液后收集样品直接进样测定，图1为1#样品的分离谱图。反应液样品平行处理三次的相对标准偏差在为0.98%到2.32%之间，样品的加标回收率在93.1%和103.4%之间。表明本方法用于实际样品的测试具有良好的重现性和较高的准确性，表1为四个样品的测定结果。 图1某反应液样品分离谱图 表1反应液样品的测定结果 参考文献 [1]. 刘桂荣，邱晔，杨群水，烟草科技，2006，8：33-34,37 [2]. 朱海英，张继昌，山西职工医学院学报，2002，12(1)：5 [3]. 朱德文.临床检验杂志，2005，23（6）：474