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分析化学论文 浅谈电泳技术 年纪： 09 级 学号： 姓名： 曾 发 古 专业： 药 学 指导老师：吴建宏老师 2010年11月04日 浅谈电泳技术 09药本（1）班 曾发古 指导老师：吴建宏老师 摘要：介绍电泳技术的发展史，介绍目前发展较快的几种电泳技术的原理和技术优势，阐述电泳技术在各领域中的最新应用和发展特点，对电泳技术的发展做了展望。 关键词： 电泳 原理 优势 应用 特点 展望 电泳是指混悬于溶液中的样品（有机的或无机的，有生命的或无生命的）电荷颗粒,在电场影响下向着与自身带相反电荷的电极移动的现象。众所周知，目前最先进的电脑和最精巧的机器人，也难以和蚂蚁的精巧 程度相比。而且蚂蚁还能传宗接代，更是现代技术所望尘莫及的。而蚂蚁的这些特性与核酸和蛋白质的结构与功能是分不开的。核酸（包括脱氧核糖核酸和核糖核酸）可降解成片段，还可进一步降解成核苷酸；蛋白质（包括酶和同工酶）多肽和氨基酸等都具有可电离的基团，基团在溶液中能吸收或者给出氢离子，从而成为电荷粒子；又由于电荷粒子的多少不等以及具有相同电荷的分子又有大有小，于是在不同的介质中，在电场影响下，它们移动的速度也不相同了。人们利用这种特性，用电泳的方法对上述物质进行定性及定量分析，或者将一定的混合物分离成各个组份以及作少量电泳制备。因为电泳技术的这种独特功能，所以就成了分子生物学研究工作中不可缺少的重要分析手段，被广泛应用于基础理论研究、农业科学、医药卫生、工业生产、国防科研、法医学和商检等许多领域。 电泳技术的发展史 1740 年印度科学家G.M.Bose 首次发现, 在电场的作用下, 带电颗粒将向着与其电性相反的电极方向移动, 使具有不同迁移速度的物质分离成狭窄区带, 这一现象称为电泳.1937 年, Arne Tiselius 教授首次建立了高重现性的血清蛋白移动界面电泳分离体 系. 电泳技术作为一项有效的分离和分析技术发展迅速, 并被广泛应用于蛋白质、多肽核酸和其他生物分子的分析、分离、制备和鉴定, 成为生物学、医学和药学等领域研究中不可缺少的手段之一. 自20 世纪50 年代以来, 各种电泳技术及仪器相继问世, 建立了琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳、等速电泳、双向电泳、脉冲电场凝胶电泳、印迹转移电泳、免疫电泳等一系列高分辨电泳体系.特别是20 世纪80 年代后期迅速发展起来的高效毛细管电泳技术, 具有高灵敏度、低检测限、快速、重复性好、应用范围广、可进行定量分析和自动化程度高等显著特点, 将电泳技术推向一个新的阶段[1]. 按电泳的原理有三种形式的电泳分离系统:原则上按电泳的原理来分,即移动界面电泳(moving boundaryelectrophoresis) 、区带电泳(zone electrophoresis) 和稳态电泳(steady state electrophoresis) 或称置换(排代) 电泳(dis2placement electrophoresis) 。在自由移动界面电泳,是带电分子的移动速率通过观察界面的移动来测定,该方法已成为历史。代之以采用支持介质的区带电泳。区带电泳因所用支持体的种类、粒度大小和电泳方式等不同,其临床应用的价值也各有差异。固体支持介质可分为两类:一类是滤纸、醋酸纤维素薄膜、硅胶、矾土纤维素等;另一类是淀粉、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶。由于它们具微细的多孔网状结构,故除能产生电泳作用外,还有分子筛效应,小分子会比大分子跑得快而使分辨率提高。它的最大优点是几乎不吸附蛋白质,因此电泳无拖尾的现象。低浓度的琼脂糖电泳相当于自由界面电泳,蛋白质在电场中可自由穿透,阻力小,分离清晰,透明度高,能透过200～700 nm 波长的光线,故电泳结束后无须进行“透明”,可减少操作步骤及由此引起的实验误差,又因底板无色泽,也提高了对着色区带的检测敏感性,为此第一类支持介质现已被第二类支持介质所替代。 稳态电泳或称置换电泳的特点是分子颗粒的电泳迁移在一定时间后达到稳态,如等电聚焦和等速电泳。 电泳技术的原理 蛋白质或其它很多电解质在溶液中由于本身的解离或者由于吸浮液体中的某种离子而形成带电粒子这些带电粒子在外加电场的作用下发生定向移动成为电泳粒子在单位电场强度时泳动速度称为电泳迁移率即u=v/e 在确定的条件下不同物质的迁移率是不同的从而达到分离的目的电泳迁移率除了与微粒自身的属性及电场强度有关外还受缓冲液的pH 及离子强度的影响一般来说缓冲液的pH 与物质等电点相差越多物质的解