三系杂交稻亲本随机扩增多态性DNA(RAPD)分析RAPDStudiesofParentsofThree-LineHybridRice.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)20(2):1一41998 ·遗 传 快 才民 · 三系杂交稻亲本随机扩增多态性DNA(RAPD）分析① 马文宾1,2② 庄杰云，彭应财 ‘王侯聪2郑康乐’ (I．中国水稻研究所，杭州 310006) (2厦门大学生物系 厦门361005) 摘 要 选用9个随机引物对31份杂交水稻亲本材料进行了RAPD分析，共检测到60条多态性带．聚 类分析结果表明，所有供试材料可以被明确地区分。在9个随机引物中，有8个具有较高的多态性检测 能力。以这8个引物为基础，选用任两个引物即可在任一对材料中检测出多态性的频率在 ％,13％以 上，而选用任3个引物则该频率在99.21％以上。这显示了运用RAPD鉴定稻种具有简便、灵敏、高效 的优点，在鉴定杂交稻种的实践中有着良好的应用前景。 关键词 杂交水稻，RAPD，多态性频率 中图分类号 Q37 RAPDStudiesofParentsofThree-LineHybridRice MAWenbin1,2ZHUANGJieyunPENGYingcaiWANGHoucong2ZHENGKangle (1,BiotechnologyDepartment,ChinaNationalRiceResearchInstitute,Hangzhou310006) (2.BiologyDepartment,XiamenUniversity,Xiamen361005) Abstract Sevenricemalesterilelines,12manitainerlinesand12restorerlnieswereanalyzedbyRAPD with9primers,Altogether,118fragmentsweregenerated,ofwhich60detectedpolymorphismsamongrice linestested,ClusteranalysisshowedthatalllniescouldbeuniquelydistinguishedbyatleastoneRAPD marker,Eightofnineprimerscandetecthighpolymorphism.Thefrequenciesofpolymorphisminany pairsoflineswouldbehigherthan96.13%whenanytwoofthe8primerswereused.Ifanythreeofthe8 primerswereused,thefrequencieswouldbehigherthan99.21％．Theeightprimerswerethereforerecom- mendedascandidatesfortheidentificationofhybridriceseeds. KeywordsRice,RandomamplifiedpolymorphicDNA(RAPD),Frequencyofpolymorphism 近年建立的随机扩增多态性DNAR(APD）技术 ’〔〕“．具有程序简便、快速灵敏等优点，所以在遗传图谱构 建、基因定位及亲缘关系分析中得到了广泛应用．自七十年代后期，杂交水稻在我国广泛种植，为保证我国的粮 食生产发挥了重大作用。但是，近年来假冒杂交水稻种子的事件屡有发生，迫切需要建立简便、快速、准确的真 假稻种鉴定技术。最近，已有研究者将RAPD技术应用于真假杂交水稻的鉴定 3〔)。但是，要将RAPD技术成 功地运用于鉴定朱知材料的真假，必须首先了解两个相关的问题：(1)栽培稻材料之间的RAPD多态性程度如 ①本研究受到国家水稻基因组计划和农业部重点项目资助。中国水稻研究所育种系张惠廉先生提供实验材料， 特此致谢。 ②马文宾，男，26岁，硕士学位，助教；专业方向：生物技术。 2 遗 传HEREDITAS(Beijing)1998 20卷 何？(2)要应用多少个引物才能够有把握地进行鉴定？本研究以育种家提供的杂交稻亲本材料为样本进行RAPD 分析，为筛选一套适用于鉴定真假杂交稻种的引物进行了初步的探索。 1材 料 和 方 法 1.1实验材料 本研究所用的水