丙泊酚对豚鼠胃窦平滑肌细胞L-型钙离子通道的作用.pdf

丙泊酚对豚鼠胃窦平滑肌细胞 L．型钙离子通道的作用 硕士生姓名： 李 萍 指导教师： 闻庆平教授 专业名称： 麻醉学 摘 要 目的：研究丙泊酚对豚鼠胃窦平滑肌细胞膜L．型钙离子通道电流 (ICan)的影响，探讨丙泊酚对胃肠动力的影响。 方法：采用传统全细胞膜片钳技术，记录正常豚鼠胃窦平滑肌细胞 丙泊酚的溶媒成分lO％脂肪乳，用Ba”．PSS稀释成与78I_tg／ml丙泊酚同 等浓度后灌流细胞，观察IBa”变化，然后洗脱，记录电流图。丙泊酚组 低浓度丙泊酚溶液灌流细胞，观察电流随时问的变化，然后洗脱，观察 跨膜电流是否恢复。同样，在用高浓度丙泊酚溶液灌流细胞时观察记录 跨膜IBa”的变化，然后洗脱，观察IBa是否恢复。每组均应完整记录 三例以上。 结果：首先用Ca2+．PSS灌流细胞，细胞膜电位钳制在．80mV，脉冲 电压从．60mV开始，去极化刺激到+60mV，阶跃电压10mV，持续时间 mV mV～．20mV出现，在0 400ms，引出Ca2+电流(ICa”)。ICap在．30 达到最大值，电流峰值为(．63．62+1 9．46)pA，反转电位在+40mV左右 mV达到最大值，电流峰值增大 同，也是在．30mV～．20mV出现，在0 到(．286．634-5 0％脂肪乳灌流 灌流细胞，待IBaH稳定后用与7899／ml丙泊酚等容积的1 细胞，观察到IBa”没有显著变化。持续用Ba”．PSS灌流细胞，膜电位 钳制在．80mV，每间隔l0s给予细胞一次0mV电压的单刺激，持续时间 物灌流开始后IBa”先轻微增大，持续约30s，然后IBan逐渐减小。药物 灌流开始后l70s左右IBap趋于稳定，稳定时IBa2+减小到电流最大值 的(66．32士4．4 1)％。待变化稳定后用Ba2+．PSS洗脱药物，电流大小立即 开始恢复，恢复电流为加药前电流最大值的(91．83士I．24)％(n=4)。用 78p,g／ml丙泊酚溶液灌流细胞，给细胞施加同样的单刺激，IBan随时间 逐渐减小，灌流开始后约190s稳定，稳定时IBa”减小到电流最大值的 (75．63+3．5 1)％。然后用Ba2+．PSS洗脱药物，电流仍然能大部分恢复， 9)％(n=3)。 恢复电流为加药前电流值的(94．58+3．1 结论：全细胞膜片钳实验表明，亚催眠剂量的丙泊酚抑制豚鼠胃窦 平滑肌细胞跨膜钙离子内流，导致细胞内钙离子浓度降低，这可能是亚 催眠剂量丙泊酚导致胃肠道平滑肌收缩力减弱、进而导致胃肠动力减慢 的原因之一。 关键词：丙泊酚 膜片钳 L．型钙离子通道 胃肠动力 2 Effectsof on calciumchannelof propofolL—type smoothmuscle guinea·-pig Master candidate：Li degree Ping Wen Supervisor：Professor Qingping Major：Ane