应用腺病毒载体介导RNA干扰技术构建糖皮质激素受体基因阻断的人U937巨噬细胞模.pdfVIP

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2017-09-03 发布于重庆
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应用腺病毒载体介导RNA干扰技术构建糖皮质激素受体基因阻断的人U937巨噬细胞模.pdf

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中国临床康复第卷第期 10 29 2006-08-10出版 ChineseJournalofClinicalRehabilitation,August102006Vol.10No.29 89 ·基础研究· 应用腺病毒载体介导 RNA干扰技术构建糖皮质激素受体基因阻断的人U937巨噬细胞模型☆ 1 1 1 2 3 4 1 1 张方 ,辛晓峰 ,施毅 ,刘玉秀 ,钱桂生 ,罗向东 ,赵明 ,李子玲 1 2 解放军南京军区南京总医院,呼吸内科,科研科,江苏省南京市成寡核苷酸序列连入含有绿色荧光蛋白基因的腺病毒穿梭质粒 3 210002;解放军第三军医大学新桥医院呼吸研究所,重庆市 pRNAT-H1.1/Adeno中,在含有pAdEasy-1病毒骨架的BJ5183大肠杆 4 400037;解放军第三军医大学西南医院烧伤研究所,重庆市 400040 菌内进行同源重组;重组子通过脂质体介导转染293T细胞,并在 293T 张方男, 年生,安徽省庐江县人,汉族, 年解放军第三军 ☆, 1972 2005 细胞内包装为具有感染能力的病毒颗粒,通过反复感染扩增病毒以达到医大学毕业,博士,主治医师,主要从事肺部感染和急性肺损伤的病理感染靶细胞的适当滴度,通过绿色荧光表达来监控腺病毒扩增;应用生理机制研究。法检测巨噬细胞感染后糖皮质激素受体蛋白的表达。 Westernblot U937 中图分类号:R318 文献标识码:A 文章编号:1671-5926(2006)29-0089-03 收稿日期修回日期 · 结果:转染腺病毒载体的293T细胞表达绿色荧光,随着时间逐渐增强, :2006-01-06 :2006-01-25 (05-50-12-10018/GLL) 并且出现明显的细胞病变效应,经过轮扩增,病毒达到合适的滴度。 3 Constructionofglucocorticoidreceptorgeneblockmodelin 受腺病毒感染的U937巨噬细胞内糖皮质激素受体蛋白表达明显降低。 humanmacrophageU937withRNAinterferencemediatedby 结论:可以成功构建针对糖皮质激素受体基因的RNA干扰腺病毒载体。 adenovirusvector 主题词:受体,糖皮质激素;腺病毒科;基因;转录,遗传 1 1 1 2 3 ZhangFang,XinXiao-feng,ShiYi,LiuYu-xiu,QianGui-sheng,Luo 4 1 1 Xiang-dong,ZhaoMing,LiZi-ling