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- 2017-09-03 发布于湖北
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1.下列叙述符合基因工程概念的是( )
A.B(淋巴)细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B(淋巴)细胞中的抗体基因
B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株
C.用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株
D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上
2.根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有____________和___________。
(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:
AATTC……G
G……CTTAA
为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是___________________________。
(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即__________DNA连接酶和_________DNA连接酶。
(4)反转录作用的模板_________是,产物是___________。若要在体外获得大量反转录产物,常采用___________技术。
(5)基因工程中除质粒外,________和_______也可作为运载体。
(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是________________________________________________________。
据图回答:
(1)过程①酶作用的部位是__________键,此过程只发生在非结合区DNA,过程②酶作用的部位是_________键。
(2)①②两过程利用了酶的_________特性。
(3)若将得到的DNA片段用于构建重组质粒,需要将过程③的测序结果与________酶的识别序列进行比对,以确定选用何种酶。
(4)如果复合体中的蛋白质为RNA聚合酶,则其识别、结合的DNA序列区为基因的______________________。
(5)以下研究利用了生物分子间特异性结合性质的有_________(多选)。
A.分离得到核糖体,用蛋白酶酶解后提取rRNA
B.用无水乙醇处理菠菜叶片,提取叶绿体基粒膜上的光合色素
C.通过分子杂交手段,用荧光物质标记的目的基因进行染色体基因定位
D.将抑制成熟基因导入番茄,其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合,终止后者翻译,延迟果实成熟
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有____________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越___________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是__________________________________________。
(4)与只使用EcoR Ⅰ相比较,使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒和外源DNA的优点在于可以防止________________________________________________。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入__________酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了________________________________。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在___________________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
A.过程①获取的目的基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序
B.将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因,不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白
C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才能进行筛选
D.应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
6.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是( )
A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
7.家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可提取干扰素用于制药。
(1)进行转基因操作前,需用_________酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________________和_______________之
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