恐惧记忆相关蛋白的蛋白质组学研究.pdfVIP

V01．31 高等学校化学学报 No．4 2010年4月 CHEMICALOFCHINESEUNIVERSITIES 736—741 JOURNAL 恐惧记忆相关蛋白的蛋白质组学研究 郑君芳，刘 华，熊 英，王小柱，贺俊崎 (首都医科大学生物化学与分子生物学系，北京100069) 摘要应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定和数据库检索，分析比较了CDI和C57B哳J小鼠经条件性恐惧实 验后海马蛋白表达的差异，探讨了与恐惧记忆相关的蛋白质．CDI和C57BL／6J小鼠经条件性恐惧实验后， 海马蛋白表达存在明显差异，29种蛋白(31个蛋白点)与恐惧记忆的形成显著相关．其中24个蛋白点表达 显著上调，7个蛋白点显著下调．与恐惧记忆相关的蛋白按功能可分为如下6类：(1)能量代谢或线粒体功 能相关蛋白；(2)神经发育相关蛋白；(3)信号转导相关蛋白；(4)细胞骨架相关蛋白；(5)氨基酸代谢和 蛋白分解相关蛋白；(6)伴侣蛋白．这些恐惧记忆形成的相关蛋白深化了对恐惧记忆脑机制的认识，为研究 和治疗认知相关疾病提供了新靶标． 关键词条件性恐惧；海马；蛋白质组学；质谱 中图分类号0629；Q51文献标识码A 文章编号0251-0790(2010)04-07364)6 学习与记忆是生物体生存的必要能力．记忆力下降是认知损害疾病(如阿尔茨海默病及精神分裂 症等)的早期症状…．在学习和记忆的实验研究中，条件性恐惧记忆是常供选择的一种记忆类型，而且 在其它记忆类型的实验研究中，也常涉及应激事件的影响旧J，如在Morris水迷宫中的训练就是对受试 动物的应激事件¨J．条件性恐惧的形成既是一种学习和记忆的过程，也是一种情绪的形成过程．恐惧 情感的产生可能是前额叶皮层、海马和杏仁核3个脑区共同激活的结果，而环境恐惧(Contextualfear) 则更多依赖于海马区，因为直接损毁海马或使其失活能够破坏条件性恐惧的获得Ho与巩固过程¨J．记 忆的获得依赖于蛋白合成∞．7J，但目前关于记忆蛋白的系统研究相对较少，而与条件性恐惧相关的记 忆蛋白的研究更为有限．不同小鼠品系的突触可塑性和认知功能存在差异悼q引，或在执行不同任务 时一1认知功能不同．本研究组以往研究结果表明¨0|，封闭群CDI小鼠和近交系C57BL／6J小鼠在空间 记忆任务中的表现不同，提示它们在恐惧记忆任务中的表现也存在差异．虽然对导致这种差异的原因 有一些分子水平的解释(如有可能是由于记忆相关蛋白的表达水平有差异所致)，实验结果也表明各种 记忆相关的膜蛋白表现出品系依赖性的表达¨11，但是缺乏系统解释．因此有必要系统地搜索记忆形成 相关的蛋白级联途径的成分．蛋白质组学技术可同时调查蛋白通路和级联途径，是分析学习记忆复杂 机制的理想工具。C57BL／6J近交系小鼠在条件性恐惧实验中表现较好且一致性强¨引，因此是良好的 依赖海马的学习和记忆小鼠模型，常被用作空间记忆能力多株比较的标准表现株．CDI小鼠品系是在 各种记忆任务中表现较好的封闭群¨3|，与其它封闭群相比，CDl小鼠空间记忆能力更强【l4‘．因此本 文利用蛋白质组学方法分析比较C57BL／6J小鼠和CDl小鼠经过条件性恐惧(Fearconditioning)实验后 海马蛋白表达水平的差异，以系统地研究与恐惧和情感记忆相关的蛋白质及其品系依赖性． 1材料与方法 1．1材料与仪器 实验动物为健康CDl和C57BL／6J小鼠(每组20只)，由维也纳医科大学动物中心提供．选用鼠龄 收稿日期：2009-07-01． 2008ZR01)资助． he@o．℃mtl．edu．c11 联系人简介：贺俊崎，男，博士，教授，主要从事蛋白-蛋白相互作用及蛋白质组学研究．E-mail：jq 万方数据 No．4 郑君芳等：恐惧记忆相关蛋白的蛋白质组学研究 737 lO一14周的雄性鼠，并分笼饲养，自由饮用饲料和水，动物搴昼夜交替自然采光．