Pkm2_shRNA真核表达载体_省略_粒细胞白血病耐药细胞株的作用研究_孙明莉(1).pdfVIP

中国实验血液学杂志 Jour al of Expermi e talH em atology 2010; 18( 1) : 85- 89 # 85# ( Article ID): 1009- 2137( 2010) 01- 0085- 05 # # Pkm2-shRNA 1 2 2 2 孙明莉, 王冠军, 李江 , 崔久嵬, 张爱丽, 王中南 , 李晓萌 , 李薇 吉林大学第一医院肿瘤中心, 吉林长春 130021; 1 吉林大学口腔医院口腔修复科, 吉林长春 130041; 2 东北师范大学生命科学学院, 吉林长春 130024 本研究旨在构建M2型丙酮酸激 ( M2-pyruvate k i ase; PKM 2)的小发夹结构 RNA ( shRNA ) 的真核表 达载体, 研究特异性沉默 pkm2基因对急性早幼粒细胞白血病(APL) 耐药性的影响设计 pkm2 基因的 3 个特异 shRNA序列, 利用基因重组技术将其克隆到含有 U6启动子的 PBSU6载体上, 通过 切和测序等方法鉴定重组质 粒的正确性利用 W ester b lot方法检测了 pkm 2-shRNA 对急性早幼粒细胞白血病耐药细胞株 NB4R2细胞内源性 M 2-PK 蛋白表达的影响, 通过 NBT还原实验检测了 pkm2基因沉默后 NB4R2 细胞分化情况结果表明: 成功构建 了 3 个有效特异的 pkm2-shRNA, 在蛋白水平上证明了其对NB4R2细胞M 2-PK 基因沉默的有效性发现干涉M 2- PK基因后, 可显著地促进耐药细胞 NB4R2细胞的分化结论: DNA 载体途径的 pkm 2-shRNA能促进早幼粒细胞 白血病细胞的分化, 具有基因靶向药物开发前景 M 2型丙酮酸激 ; 小发夹结构 RNA; NB4R2细胞; 急性早幼粒细胞白血病 Q789; R733. 71 A Construction of shRNA Eukaryotic Expression Vectors of pkm2 Gene and TheirEffect onD rug ResistantCell Line ofAcute Promyelocytic Leukemia 1 2 2 SUN M i g-Li, WANG G ua -Ju , LI J ia g , CU I Jiu-W ei, ZHANG A i-Li , WANG Zho g-Na , 2 LIX iao-M e g , LIW ei 1 Ca cer Ce ter, The F irstH ospita l, Jili U iversity, Cha gchu 130021, Jili Provi ce, Chi a; D epartm e t o fO ra l a dM axillo facial Surgery, Stom a to log ic Ho spita l, Jili U iversity, Cha gchu 130041, Jili P rov i ce, Chi a; 2 Schoo l of L ife Scie ces, Northeast