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嗅鞘细胞与雪旺氏细胞胞内蛋白的比较 王晋，朱悦 中国医科大学附属第一医院，沈阳（110001 ） E-mail ：Kingwung@163.com ，zhuyuedr@163.com 摘 要： 【目的】利用蛋白质组学双向电泳的实验方法,比较嗅鞘细胞(Olfactory ensheathing cells , OECs) 与雪旺氏细胞（Schwann’s cells,SC ）胞内蛋白的差异. 【方法】以原代培养的方 法分离、培养、纯化成年大鼠嗅球 OECs 及 SC。分别提取两种细胞胞内蛋白,双向电泳分析 蛋白差异点。结果 (1)原代培养 OECs 纯度可达 90 %以上,SC 的纯度可达 95%以上。(2) OECs 和 SC 的胞内蛋白存在多个蛋白点的表达差异 。【结论】两种细胞都达到了一定的高 纯度，OECs 和 SC 胞内蛋白的差异比较明显，差异的蛋白点可能是决定了两种细胞在脊髓 损伤时不同功用的关键。 关键词：嗅鞘细胞，雪旺氏细胞，双向电泳，胞内蛋白 嗅神经系统在一生中都在进行嗅觉感受器神经元的神经再生[1]，嗅鞘细胞同时具有周围 神经系统雪旺氏细胞和中枢神经系统星形胶质细胞的特性[2]，轴突横断后嗅上皮层新生的嗅 觉感受器神经元增量增殖其轴突到中枢神经系统的嗅球小球层 [3]，嗅鞘细胞能够包绕从嗅 上皮层延伸到嗅球小球层的新生轴突成鞘。它通过分泌各种促进神经轴突再生的物质提供允 许轴突再生延长的微环境，使轴突较容易的进入中枢神经系统。研究证明嗅感受神经元轴突 的延长和向嗅球的靶向运动主要受嗅鞘细胞的支持[4] 。另外，一些报道提出嗅神经层内层的 幼稚嗅鞘细胞在再生和发育的过程中可以改变他们的形状和增殖数量并且可以调控重排嗅 感受神经到达嗅球[5] [6] 。同时它又有雪旺氏细胞所不具备的特点：嗅鞘细胞能够沿着宿主神 经通路在胶质细胞的校直下移行的更远；嗅鞘细胞能够抑制轴突分支和游走，诱导轴突快速 [7] [8] [9] 直线生长穿过损伤区域直达通路远端 。大量的试验证明了嗅鞘细胞成功的促进体内 ， 和体外[10] [11] [12] 的轴突再生。其中嗅鞘细胞能够分泌各种促进神经轴突再生延伸的物质提供 有利的微环境在它促进轴突再生的能力中扮演一个重要的角色。 Boruch 等的研究发现嗅鞘细胞的单克隆细胞系表达神经生长因子（NGF ）、脑源性神 经营养因子（BDNF ）、神经营养素（NT-4/5 ）和neu 基因调节剂（neuregulins ）的mRNA 。 但是不表达NT-3 和睫状神经营养因子（CNTF ）的mRNA[13] [14] 。Woodhall 等研究发现嗅鞘 细胞表达NGF 、 BDNF 、GDNF 和NTN 的mRNA 。[15] Adam 和Lipson 等则对不同发育阶 段的嗅鞘细胞表达的神经再生相关蛋白进行了研究，结果发现不同时期的嗅鞘细胞表达的情 况也不相同[16] 。除了神经营养分子，研究还发现嗅鞘细胞可以分泌大量的诸如N-CAM 和层 [17] [18] [19] 粘连蛋白等细胞外基质分子 。N-CAM 基因缺乏的小鼠嗅球显著的小于正常的小鼠 。 [20] [21] 同时嗅鞘细胞还表达一些对轴突再生起抑制作用的蛋白，诸如GFAP、CSPGs、Nogo 等 。 另外, Au E 等人发现了OEC 中表达SPARC,可以促进SC 的生长,并且能够促进脊髓损伤的修 复[22] [23] 。OEC 和SC 中蛋白质的表达具有一定的差异，可能决定了良种细胞在脊髓损伤修 复中的功能差异[24] 。对于嗅鞘细胞表达的神经营养因子及其他因子仍存在许多争议。 1. 材料与方法 1.1 材料