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流式细胞仪测定细胞周期的技巧
西安交通大学 张殿增
背景:在测定细胞周期的时候,由于固定、消化等处理后会出现很多细胞碎片,影响测量结果,无法
找到G1 期细胞群。另外,在测定亚二倍体时,不是那么很清楚的显示出来。因此,根据自己多年来的
操作经验,总结出了一些很好的测定技巧。
方法改进:
经验1.在测定细胞周期的时候(以BD 公司的Calibur 为例),除了设置好获取数据的模版外,另
外设置以FL3 为横坐标的直方图,测量模式为对数(log),调整放大倍数,使二倍体峰出现在横坐标
10*3 的位置,就很容易的找到了二倍体峰和细胞周期个时相细胞的分布情况。根据它再调节FL2 (线性
模式下)的放大 倍数,使二倍体峰在10*2 的位置即可。
经验2.在测定细胞周期时,可以同时测定细胞凋亡。此时,也可以用上述办法,用FL3 通道测定,
再用modfit 软件分析,结果是彩色图,很好看,也不影响细胞周期的分析。
结果:
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