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生物技术通报
年第 期
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2007 6
杨梅基因组DNA提取方法筛选和优化研究
1 2 1 2 2 1
孙志栋 柴春燕 袁妮娜 黄胜利 徐永江 徐小君
1 2
( 宁波市农业科学院,宁波 ;浙江省慈溪市林特技术推广中心,慈溪 )
315040 315300
摘 要: 选择具有代表性的杨梅品种 份,分别采用 法和 法,选取嫩叶进行基因组 提取比较研
20 CTAB SDS DNA
究,结果表明,由于叶片中含有较高的酚类物质,相对来说CTAB法优于 SDS法,提取的基因组DNA色泽白亮且数量
多,而且同一提取方法如CTAB法,不同品种之间提取得率也有较大差异。在CTAB法的基础上,选取两个品种研究水浴
时间对DNA提取的影响,发现DNA得率随水浴时间的延长呈现抛物线态势,最佳水浴时间随样品颗粒的大小而变化,
一般最佳时间为30~40min,样品颗粒较细时水浴时间以30min为最佳,较粗时则为40min。添加异丙醇量以2/3为好,析
出 的最佳离心速度和时间分别为 和 。
DNA 5000r/min 10~15min
关键词: 基因组DNA 提取方法 筛选 优化 杨梅
OptimizationofExtractionConditionsandMethodsfor
GenomeDNAinMyrica
1 2 1 2 2 1
SunZhidong CaiChunyan YuanNina HuangShengli XuYongjiang XuXiaojun
(1 , ;
NingboAcademyofAgriculturalandSciencesNingbo315040
2 , )
CixiCityForestandSpecialCenterofZhejiangCixi315300
:
Abstract BothCTABandSDSwerecomparedforabstractinggenomeDNAusingyoungleavesof20Myrica
rubravarieties.TheresultshowedthatgenomeDNAforCTABweremoreandblighterthanforSDSbecauseofupper
hydroxybenzenecontentintheleavesofwaxberry.Besidesthereweredifferencesforextractioncontentsofgenome
DNAamongvarietieseventhoughthesameextractionmethodsuchasCTAB.Itwasstudiedeffec
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