杨梅基因组DNA提取方法筛选和优化研究.pdfVIP

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生物技术通报 年第 期 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2007 6 杨梅基因组DNA提取方法筛选和优化研究 1 2 1 2 2 1 孙志栋 柴春燕 袁妮娜 黄胜利 徐永江 徐小君 1 2 ( 宁波市农业科学院,宁波 ;浙江省慈溪市林特技术推广中心,慈溪 ) 315040 315300 摘 要: 选择具有代表性的杨梅品种 份,分别采用 法和 法,选取嫩叶进行基因组 提取比较研 20 CTAB SDS DNA 究,结果表明,由于叶片中含有较高的酚类物质,相对来说CTAB法优于 SDS法,提取的基因组DNA色泽白亮且数量 多,而且同一提取方法如CTAB法,不同品种之间提取得率也有较大差异。在CTAB法的基础上,选取两个品种研究水浴 时间对DNA提取的影响,发现DNA得率随水浴时间的延长呈现抛物线态势,最佳水浴时间随样品颗粒的大小而变化, 一般最佳时间为30~40min,样品颗粒较细时水浴时间以30min为最佳,较粗时则为40min。添加异丙醇量以2/3为好,析 出 的最佳离心速度和时间分别为 和 。 DNA 5000r/min 10~15min 关键词: 基因组DNA 提取方法 筛选 优化 杨梅 OptimizationofExtractionConditionsandMethodsfor GenomeDNAinMyrica 1 2 1 2 2 1 SunZhidong CaiChunyan YuanNina HuangShengli XuYongjiang XuXiaojun (1 , ; NingboAcademyofAgriculturalandSciencesNingbo315040 2 , ) CixiCityForestandSpecialCenterofZhejiangCixi315300 : Abstract BothCTABandSDSwerecomparedforabstractinggenomeDNAusingyoungleavesof20Myrica rubravarieties.TheresultshowedthatgenomeDNAforCTABweremoreandblighterthanforSDSbecauseofupper hydroxybenzenecontentintheleavesofwaxberry.Besidesthereweredifferencesforextractioncontentsofgenome DNAamongvarietieseventhoughthesameextractionmethodsuchasCTAB.Itwasstudiedeffec

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