流式细胞术在血栓及出血性疾病中的作用.pdfVIP

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流式细胞术(FCM )是以流式细胞仪为检测手段的 流式细胞术 一项能快速、精确的新技术。能对大量单个细胞进 行快速、灵敏、多参数检测,能客观的定性又定量 在血栓及出血性疾病中的应用 测定细胞膜、浆、核的抗原表达,已经成为血栓与 出血性疾病的一个新的诊断方法。 苏州大学附一院血液科 江苏省血液研究所 韩悦 工作原理 采用激光作为激发光源 前向散射光(forward scatter, FS ):激光束照射细胞 时,光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测 细胞等粒子的表面属性,强度与细胞的大小有关,对 荧光染料与单克隆抗体技术结合 同种细胞群体随着细胞截面积的增大而增大。 计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的 侧向散射光(side scatter, SS ):激光束照射细胞时, 多个参数信号进行数据处理分析 光以90 °角散射的信号,用于检测细胞内部结构属 性,获取有关细胞内部精细结构的颗粒性质的有关信 息。 流式细胞术特点 设门:即选择特殊的细胞群体分析其各个参数的表 能在保持细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被 现,分析局限在门内的细胞群体的前提是门内的细胞 破坏的状态下,通过荧光探针的协助,从分子水 代表所有感兴趣的细胞,而且没有其他细胞的污染。 平上获取多种信号对细胞进行定量分析。 快速、大量、准确、灵敏 FCM在血栓与出血性疾病中主要关注血小板功 由于FCM的快速、简便和准确性,对于以往使 能分析和血小板疾病。 用检测、诊断血栓出血性疾病的酶免疫分析、 (1)血小板功能分析主要基于其膜上丰富的糖 形态观察及免疫印迹等方法已经逐渐被FCM取 蛋白受体,用不同的抗血小板单克隆抗体可以 代,成为辅助和补充检测手段。 测定和分析血小板功能状态。

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