应用激光捕获显微切割及蛋白质组学技术筛选鼻咽癌间质相关蛋白.pdfVIP

第37卷第6期 南华大学学报 ·医学版 2009年 11月 Vol_37No．6 JournalofUniversityofSouthChina(MedicalEdition) Nov．2009 · 基础研究 · 应用激光捕获显微切割及蛋白质组学技术 筛选鼻咽癌问质相关蛋白 李美香，谢远杰，赵国军，石金凤，张晓红，龙治峰 (南华大学 医学院 组织胚胎学教研室，湖南 衡阳421001) 摘 要： 目的 筛选与鼻咽癌 (NPC)发生发展相关的特异性问质蛋白。 方法 采用激光捕获显微切割 技术(LCM)，获取高纯度的NPC间质和正常鼻咽黏膜 (NNM)间质，二维凝胶电泳(2一DE)及质谱技术，分离鉴定 间质相关蛋白。Westernblot及组织芯片免疫组织化学技术，验证差异蛋白s10oA9在鼻咽癌间质和正常鼻咽黏膜 组织中的表达水平。 结果 建立了鼻咽癌间质和正常鼻咽间质的2一DE图谱，高通量筛选与肿瘤发生相关的间 质蛋白，质谱鉴定得到6o个差异蛋白。Westernblot及免疫组织化学技术验证结果与蛋白质组学结果一致。 结 论 这些差异表达的蛋白将有助于揭示鼻咽癌细胞和周围间质的关系。对间质蛋白功能的进一步研究，将有助于 解析间质在肿瘤发生发展中的作用机制，从间质途径寻找肿瘤治疗的靶标。 关键词： 鼻咽癌； 间质；LCM； 蛋白质组学 中图分类号：R739．6 文献标识码：A 文章编号：1672—7444(2009)06—0643—05 ScreeningfortheStroma—relatedProteinsinNas0pharyngeal CarcinomabyLaserCaptureM icrodissectionandProteomicAnalysis LIMei—xiang。XIEYuan—jie，ZHAOGuo—jun，etal D【epartmentofHistologyandEmbryology。UniversityofSouthChina- Hengyang，Hunan421001，China) Abstract：Objective ToSClagenthestromal—relatedproteinsinvolvedinnasopharyngealcarcinoma(NPC)carcino- genesis． Methods Lasercapturemicrodissection(LCM)wasperformde topurifystmmalcellsfromtheNPCandnor- malNasopharyngealmucosa(NNM)。respectively．TheproteinexpressedprofliesofthestromaofNPCandNNMwere comparedusingtwo—dimensionaleleetrophoresisandthedifferentialproteinsbetweenthe2typesofstromawereidentifide byMALDI—TOF—MS．Western blotnadimmunohistochemistryoftissuemicmarraywereusedtoconfimr theexpressionof thedifferentialproteinS100A9inNPC andNNM． Results 2——DE patternsofstromaofNPC andNNM were estab- lishde 。nad60differentialproteinsintheNPCandNNM wereidentil