肉鸡热休克蛋白70mRNA荧光定量PCR方法的建立和优化.pdfVIP

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2017-09-02 发布于重庆
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肉鸡热休克蛋白70mRNA荧光定量PCR方法的建立和优化.pdf

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业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2006,14 (1): 45~50 ·研究论文· 肉鸡热休克蛋白70 mRNA 荧光定量PCR 方法的建立和优化* 孙培明1，2 1 2 鲍恩东 ** 王志亮 ( 1. 南京业大学动物医学院，南京210095; 2. 农业部动物检疫所国家外来动物疾病诊断中心，青岛266032) 摘要：对适应性饲养到30 日龄时的60 只肉鸡进行热应激处理，通过热休克蛋白70 (heat shock protein 70 ， ) mRNA 荧光定量PCR (fluorescence quantitative PCR ，FQ-PCR) 方法检测热应激处理肉鸡组织中 mRNA 含量。虽然受试鸡肝脏和心脏的 mRNA 水平在热应激6 h 时略低于对照组( 0.05) ，但随持续性高温应激时间的延长， mRNA 水平逐渐升明显高于对照组高，热应激 18 h 时应激肉鸡肝脏和心脏 mRNA 水平达最高水平， ( 0.0 1)。实验选用3- 磷酸甘油醛脱氢酶基因( )作为内参照，体外转录的RNA 和阳性质粒作为两种标准品。结果显示，实验所建立和优化的FQ-PCR 反应体系是理想的。关键词：热休克蛋白70; 荧光定量PCR; 热应激; 肉鸡中图分类号: S183, S188 文献标识码: A 文章编号: 1006-1304(2006)01-0045-06 Establishment and Improvement on Fluorescence Quantitative PCR of mRNA in the Broilers 1，2 1 2 SUN Pei-Ming BAO En-Dong ** WANG Zhi-Liang After 30-days fed adjustably ，sixty broilers were heat stressed. By fluorescence quantitative PCR (FQ-PCR) ，heat shock protein 70 ( ) mRNA in heat stressed broilers was measured. mRNA transcription in the livers and the hearts of the heat stressed broilers was less reduction than that of the control group ( 0.05) at the 6 h heat stress. mRNA transcription level in- creased gradually with prolonging of heat stress and got the highest transcription level at th