三种获取目的基因的PCR方法32025.pdfVIP

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2017-09-02 发布于重庆
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三种获取目的基因的PCR方法32025.pdf

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《乳业科学与技术》年第期 (总第期) 2008 4 131 195 三种获取目的基因的PCR方法李鹏,刘文忠,栗艳 (山西农业大学,山西太谷县 ) 030801 摘要:对反向PCR、反转录PCR和锚定PCR几个常用的PCR方法的概况及其使用,做了简单介绍。关键词:反向反转录锚定 PCR; PCR; PCR 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: Q789 A 1671-5187(2008)04-0195-04 TheIntroductionofPCRTechniqueforTargetGene LiPeng,LiuWenzhong,LiYan (ShanxiAgriculturalUniversity,TaiguofShanxi030801,P.R.China) Abstract:severalPCRtechniquefortargetgene,suchasinversePCR,reversePCR,anchoredPCR wereintroducedgenerally. Keywords:inversePCR;reversePCR;anchoredPCR 基因工程流程的第一步就是获得目的于年与等人正式表了第一篇相关的论 DNA 1985 Saiki 片段,如何获得目的片段就成为基因工程的文。此后, 的运用一日千里,相关的论文发表 DNA PCR 关键问题。所需目的基因的来源,不外乎是分离自质量可以说是令众多其它研究方法难望其项背。然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有随后PCR技术在生物科研和临床应用中得以广法、化学合成法、法及建立基因文库的泛应用,成为分子生物学研究的最重要技术。 PCR cDNA [1] 方法来筛选等。 Mullis也因此获得了1993年诺贝尔化学奖。 PCR是一种在体外快速扩增特定基因或 [3] 1PCR的概念 DNA序列的方法,故又称为基因的体外扩增法。 PCR技术是 1985年美国公司 Cetus公司 PCR技术自问世以来已成为获得外源基因的一 Mullis等人建立的一套大量扩增特异DNA片段个有效的手段,只要直到目的基因的核苷酸序列, 的系统,即聚合酶链式反应 (polymrasechain 人们就可设计一段引物,利用PCR技术,在试管 , )。聚合酶( ) 中建立反应,经数小时之后,就能将极微量的目的 reactionPCR DNA DNApolymeraseI 最早于 1955年发现 ,而较具有实验价值及实用基因或特定的DNA片段扩增数十万倍,乃至干百性的则是于年代万倍。