qa-3稀有密码子和mRNA结构改造及其在大肠杆菌中的高效表达.pdfVIP

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2017-09-02 发布于重庆
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卷期生物工程学报 !! ! %’ (!! ) (! 年月 !# $ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 *+,-. !# !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! !! 稀有密码子和#$% 结构改造及其在大肠杆菌中的高效表达 ’() *(+,-). /0 $+1) */2/, +,2 #$% 66)7)1+4) 89:1)..;/, /0 !! ;, #$%’()%) %*+) F F ! F 刘礼兵，刘云，何华庆，李永辉，徐琪寿 F F ! F F ，，， NOP N1IQ1AG NOP R?A SL S?+IT1AG NO RAGIS?1 +A3 UP T1IB.? F 军事医学科学院放射与辐射医学研究所，北京 FH6 ! 南昌大学生命科学院，南昌 $$VK ，，， F 3$/#/)/% (- 4+5#+/#($ 6%5#0#$% 70+5%82 (- 6#,#/+*2 6%5#0+, 90#%$0% .%#: #$1 FH6 !#$+ ，，， ! !(,,%1% (- ;#- % 90#%$0% +$0+$1 =$#%*#/2 +$0+$1 $$VK !#$+ 摘要奎尼酸脱氢酶的高表达是奎尼酸生物合成的代谢工程研究的关键和基础。粗糙脉孢菌基因组中编码奎尼酸脱氢酶的基因在大肠杆菌中不表达，根据大肠杆菌密码子使用频率分析基因，发现有个稀有密码子，其中编码（） ?+I $ ?+I $ !K 7,G / 的有个，编码（）的有个。编码精氨酸的（）两个稀有密码子紧密相连（区），另外还有个相对比较集中的 H W’@ W J 7WW 7W7 / 密集区区。进一步通过计算机分析其基因二级结构，发现改变和末端个别碱基对其二级结构的影响 WWW W ?+I $ 4/)7 6X $X 很大，可以使4/)7 的自由能由野生型的I$KV Y$ Z[4’ 降低到最小\ H Y6 Z[4’，从而大大减少4/)7 两端二级结构的产生，而仅仅改变区和区的稀有密码子自由能变化很小。通过对该基因密码子改造和优化和末端对其二级结构的 / W 6X $X