三七鲨烯合酶基因在三七根_茎_芦头中的转录表达与三萜皂苷合成.pdfVIP

ISSN 中国生物化学与分子生物学报 2007 年 12 月 CN 　113870Q Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 23 ( 12) :1000～1005 三七鲨烯合酶基因在三七根 、茎 、芦头中的 转录表达与三萜皂苷合成 吴耀生 , 　朱 　华 , 　李 　　 , 　赵瑞强 , 　蓝秀万 (广西医科大学生物化学与分子生物学教研室 ,广西 南宁　530021) 摘要 　三萜皂苷是三七 、人参等重要药用植物的主要有效成分. 采用改进的异硫氰酸胍法提取到三 ( ) 七 RNA ,经 RTPCR 克隆技术获得三七三萜合成通路关键酶之一鲨烯合酶 squalene synthase , SS cDNA ,长1 270 bp ,读码框架编码 4 15 个氨基酸. 比对分析表明 ,推衍的三七 SS 氨基酸序列与人参 、 积雪草 、青蒿 、拟南芥和水稻 SS 的一致性分别为 98 % 、89 % 、81 % 、78 %和 71 %. 利用实时荧光定量 RTPCR 技术对三七根 、茎 、芦头的 SS 转录表达研究发现 ,一年生三七根 SS 基因转录表达量最高 , 高于茎和芦头的表达 ;但总皂苷含量是 :芦头 叶 根 茎. 可能与 SS 之后其它三萜合成关键酶的 活性差异或和三萜合成后的定向输送及累积有关. 关键词 　三七 ;鲨烯合酶 ;三萜皂苷 ;cDNA 克隆;转录 ;实时荧光定量 RTPCR 中图分类号 　Q786 Transcription Expression of Squalene Synthase Gene in Root , Stem and Rootstock of Panax notoginseng and Synthesis of Triterpenoids WU YaoSheng , ZHU Hua , L I Shen , ZHAO RuiQiang , LAN XiuWan ( Dep artment of B iochemistry and Molecular B iology , Guangxi Medical University , N anning 　530021 , Guangxi , China) Abstract 　Triterpenoids are the principal effective components of various important Chinese traditional medicines such as Sanqi ( Panax notoginseng ) and Ginseng ( Panax ginseng ) , etc . Sanqi total RNA were extracted with improved guanidine thiocyanate method , and cDNA of squalene synthase ( SS) , one of key enzymes on the triterpenoid