芝田硫化叶菌ssh7a和ssh7b基因在大肠杆菌中的表达及重组蛋白的性质.pdfVIP

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卷 期 微 生 物 学 报 ’$ ’ HCI’$ -CI’ 年 月 *$$$ + !#$%’()(*($,-$ .GG0@ *$$$ + J 芝田硫化叶菌 !!##和!!#$基因在大肠杆菌中 的表达及重组蛋白的性质! 陈绪林 唐玉秋 黄 力!! (中国科学院微生物研究所 微生物资源前期开发国家重点实验室 北京 ) $$$+$ 摘 要:极端嗜热古菌———芝田硫化叶菌 结合蛋白 和 的编码基因( ,-. /01#2 /01#3 !!## 和 )在大肠杆菌中得到表达,表达量均达到细胞蛋白总量的 。重组蛋白通 !!#$ $4!54 过一个包括热处理步骤的简单纯化程序得到纯化。重组 和 与松弛及负超螺旋 /01#2 /01#3 的结合与天然 蛋白无异,与天然 相似, 在与 结合时能够固定负超 ,-. /01# /01# /01#2 ,-. 螺旋,每固定一个负超螺旋约需 个 分子。这些结果表明天然 蛋白中的两个同 ** /01#2 /01# 源多肽与 结合时无明显差异。另外, 的甲基化与否似乎不影响该蛋白对 的 ,-. /01# ,-. 亲和力及固定,-.超螺旋的能力。 关键词:芝田硫化叶菌, 结合蛋白,基因表达, 超螺旋 ,-. ,-. 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) 6#+% . $$$(%*$ *$$$ $’($!5(%’ 硫化叶菌属于极端嗜热古菌,最适生长温度在+$7左右。研究发现,硫化叶菌富含 [ ] 小分子碱性,-.结合蛋白!! 。这些蛋白对于硫化叶菌染色体的结构和功能可能有重 要影响。同时,由于硫化叶菌,-. 的89:含量不到’$4、且细胞内盐浓度较低,推测 其含量丰富的,-.结合蛋白对于染色体,-. 的热稳定性十分重要。我们从芝田硫化 叶菌( )中分离纯化出分子量为 和 的两种 结合蛋 %’)’)$!!*$#+#, %;5, $;5, ,-. ( [,]

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