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维普资讯 2007年 第 42卷 第 6期 生 物 学 通 报 51 利用新生子叶制备牡丹染色体的研究 术 蔡 华 1,2 夏海武 袁庆军 (1安徽科技学 院生命科学学 院 安徽凤 阳 233100 2安徽农业大学农学 院 安徽合肥 230036) 摘要 首 次报道 了利 用牡 丹 (P．sulTruticosa)种子 的新 生子 叶制备 染 色体 ，同时比较 了根 尖染色体 的 核型，结果表 明：牡丹子 叶和根尖染色体核型数据一致 ，2种方法获得 的染色体数均为 2n=10，核型公 式为 2n=2x=10=6m+2sm+2st，全套染色体未见随体；2种方法获得的染色体形态结构基本相 同。相对根 尖而言 ，牡丹种子的新生子叶面积大，容 易获得更 多的试材 ，说 明利用新生子叶制备染色体更适合遗 传 学实验研 究 关键词 牡丹 子叶 染 色体核 型 牡丹 (2n=2x=10)是芍药属fPaeoonia1)毛莨科 Ranun— 供试材料为安徽科技学院生命科学学院园艺实验 calaceae)多年生植物。牡丹不仅是驰名中外的观赏花卉， 室 2005年收获的新鲜牡丹种子。染色体永久制片凭证 有 “花 中之王”的美称 ，也是著名 的中草药 ．牡丹茎皮是 标本保存于安徽科技学院生命科学学院植物学实验室， 中药的 “丹皮”。牡丹体细胞染色体较大 ，且数 目较少 ．又 凭证号为：H．CAI2005—111、H．CAI2005—112、H．CAI2005— 是遗传学实验 中非常理想 的染色体核型分析试材 ，但牡 113和 H．CAI2005—121、H．CAI2005—122、H．CAI2005— 丹种子具有很强的休眠特性，常规的根尖染色体制备方 123。种子在 1～4℃冰箱中低温处理60d后 ．于 15℃温沙 法中，种子需在低温下处理 2个月左右时间才能发芽，而 基 中避光恒温培养，待根长至 1～1．5cm时，剪根并剖开 且发芽率低 ，同时每粒种子可利用的根尖生长点细胞极 种子取新生子叶，将根尖和子叶放人 20℃的0．002otol／ 少，所有这些因素都限制了牡丹作为染色体核型分析试 L的8一羟基喹啉溶液 中处理 3h，卡诺 氏溶液 (无水 乙 验材料的研究。本文利用牡丹种子迅速生长的新生子叶 醇：冰醋酸=3：1，V／V)固定 24h，取 出材料用蒸馏水洗净 分生组织制备其体细胞染色体 ，试 图为遗传学的染色体 后放人 1mol／L盐酸溶液 中．在 60℃水浴 中解离 3～5 核型分析实验提供新型试验材料 ．同时 比较新生子叶和 min，再用蒸馏水漂洗干净．改 良苯酚品红染色 10min 根尖组织制备的染色体核型和形态结构 ．为牡丹不 同组 后压片．在 XSP—BM显微镜下观察，用带 CCD接 口的 织 的细胞学特征提供理论依据 SONY数码相机拍摄染色体图像，最后用 中性树胶封片 1 材料 与方法 选择 10个染色体分散较好 的有丝分裂 中期细胞 ●’●’’’，·’●’’···’’’●···’●’●··，’●’’’’-．．．●，●●’’’●···’●