酸枣仁汤对老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑组织Glu及GABA含量的影响.pdfVIP

酸枣仁汤对老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑组织 Glu及GABA含量的影响1 1、2 3 2 2、3* 游秋云 ，吴丽丽 ，田代志 ，王平 1 湖北中医学院药学院药理教研室，武汉（430061 ） 2 中药资源与中药复方省部共建教育部重点实验室，武汉（430061 ） 3 湖北中医学院老年医学研究所，武汉（430061 ） E-mail ：youqiuyun@126.com 摘 要：目的：探讨酸枣仁汤对老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠大脑脑组织谷氨酸（Glu ） 及γ-氨基丁酸（GABA ）含量的影响。方法：用D-半乳糖致衰老、环磷酰胺及氢化可的松 致阴血亏虚，及自制改良多平台法剥夺睡眠，制作老年阴血亏虚型失眠证候大鼠复合模型， 采用高效液相色谱法检测模型大鼠大脑皮层及下丘脑谷氨酸（Glu ）及γ-氨基丁酸（GABA ） 含量的变化，并考察酸枣仁汤对这些指标的影响。结果：与环境对照组比较，证候模型组睡 眠剥夺48h后，大鼠大脑皮层及下丘脑谷氨酸（Glu ）及γ-氨基丁酸（GABA ）含量显著升高， 且Glu/GABA比值增高，经酸枣仁汤干预后各指标明显下降(P0．01, P0．05) ，并趋于正常 范围。结论:酸枣仁汤能减少老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑内兴奋性氨基酸毒性作用， 减轻Glu 、GABA参与的迟发性神经元损害,且酸枣仁汤大剂量组作用强于小剂量组。 关键词：睡眠剥夺；模型；酸枣仁汤；氨基酸 老年阴血亏虚型失眠是临床常见老年失眠证型之一，治宜养血安神，清热除烦，[1]方用 酸枣仁汤。酸枣仁汤出自《金匮要略》，具有养血安神、清热除烦之功，用于治疗肝血不足、 虚热内扰引起的心烦失眠等症。该方是中医的安神名方，由酸枣仁、知母、茯苓、川芎、甘 草组成。现代药理研究表明，酸枣仁具有镇静催眠、抗惊厥镇静、降压、抗心律失常等作用； 茯苓则具有抗菌、镇静、利尿、免疫调节的作用；知母具有抗病原微生物、解热抗炎等作用， 此外,知母中的成分芒果苷有明显的镇静、利胆的作用；川芎则对中枢神经系统有抑制作用； 甘草对多个系统均有作用 。总之，对酸枣仁汤的大量研究表明，该方具有镇静催眠、抗焦 虑、抗应激作用。目前文献上关于中药复方治疗失眠的机理较为少见，本课题拟从神经毒性 角度探讨其安神的机理。 1. 材料 1.1 药物 酸枣仁汤由酸枣仁30g，知母12 g，茯苓12 g，川芎12 g，甘草6 g组成，全部药材购自湖 北中医学院附属医院药房。常规方法煎煮后经水提制成150％和75 ％大小两种浓度，分装灭 菌后4 ℃保存备用。 1.2 试剂 D-半乳糖，国药集团化学试剂有限公司生产（批号：）；环磷酰胺注射液(CPA): 江苏恒瑞医药股份有限公司，批号070226 ；氢化可的松注射液：山东新华制药股份有限公司， 批号060404 。Glu、GABA标准品，美国Sigma公司；邻苯二甲醛（OPA，分析纯，北京奥得 赛化学有限公司) ；乙腈(色谱纯，德国Merck公司) ；甲醇，为色谱纯；其余试剂均为分析纯 （国产），试剂用水为三蒸水。 1本课题得到武汉市科技局晨光计划的基金项目：重镇与养心安神中药治疗失眠的机理及物质基础研究 （2007.3-2009.8 ，NO ：200750731279 ）的资助。 - 1 - 1.3 仪器 睡眠剥夺箱1 （自制）：为长72cm、宽48cm、高30cm的鼠箱，内置6个直径为8cm，高为 8cm的平台，平台间间隔16cm，平台与鼠箱箱体壁间隔8cm，在平台周边注满水，水面距平 台面约1.0cm，大鼠在平台上可自行饮食饮水，并可在不同平台上自由活动。于平台之上放 平行的不锈钢丝笼罩，上面放水和食物。水温和室温保持一致，控制在22-24 ℃左右，每日 换水并打扫实验箱。睡眠剥夺箱2 （自制）：与睡眠剥夺箱1相似，但在距其底部8.0cm处不放 置平台，而是放置一面细密铁丝网，大鼠在网上可自由活动，其他条件均与睡眠剥夺组相同， 以形成与睡眠剥夺组相似