PCR介导观赏向日葵DFR基因改造及其真核表达载体构建研究初报.pdfVIP

PCR介导观赏向日葵DFR基因改造及其真核表达载体构建研究初报.pdf

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福建农林大学学报(自然科学版) 第37卷第2期 of and Science Journal Agriculture University(NaturalEdition) 2008年3月 Fujian Forestry PCR介导观赏向日葵DFR基因改造 及其真核表达载体构建研究初报 张剑亮,潘大仁,周以飞,吴明伟,柯祥德,林钿 (福建农林大学作物科学学院,福建福州350002) 摘要:二氢黄酮醇_4.还原酶(DVa)是花色素苷代谢途径中的关键酶之一,本研究利用PCR技术将观赏向日葵DFR底物结 合区敲除,并将该区域中134位保守氨基酸天冬酰胺定点突变为天门冬氨酸和亮氨酸,最后获得已敲除底物结合区的基因 pCAM-N134D和pCAM—N134L. 关键词:观赏向日葵;PCR;二氢黄酮醇_4.还原酶;底物结合位点突变;载体构建 文献标识码:A 文章编号:1671-5470(2008)02-0166-04 中图分类号:$565.5;Q781;凹84 PCR.mediatedmodificationofDFR fromornamentalsunflower gene andconstructionofthe vector gene’Splantexpression ZHANG Dian Da—ren,ZHOUYi—fei,WUMing-wei,KEXiang-de,LIN Jian—liang,PAN and ForestryUniversity,Fuzhou,Fujian350002,China) (College。fCropScience,FujianA#culmre ● thelastcommoninthe Abstract:Dihydrotlavonol4-reductase(on)cataly’zesstep anthocyaninbiosynthesispathway.Byusing ofDFRfromornamental conservedami— PCR,substrate ff,11.rtuJl.$)w幽knockedout,and一134 bindingregion 8unⅡower(Helianthus no into N134DandN134L acidresidue w矗smutated orleueine.KODFR.mutated aspara#ne aspartate wer℃successfullystopS#. also willbeusedfor Plant vector and Were pcAM—N134Lsuccessfullyconstructed,which expressionpCAM-KODFR,pC

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