不同预处理方法对大麦花药-花粉培养的影响EffectsoftheDifferentPretreatmentMethodsonBa.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)17(5):5-71995 不同预处理方法对大麦花药一花粉培养的影响 李 文 泽 胡 含 莱（M农学院农学系，山东莱阳265200) （中国科学院遗传研究所，北京 100101) 摘 要 研究了甘露醇预处理的适应性以及pH值对甘露醇预处理效果的影响；并首次将山梨醇预处理 应用到大麦花药培养中，获得理想的实验结果．第一，采用甘露醇预处理，17种材料平均愈伤组织诱 导率为20.67块 ／花药，绿苗产量为2.46株 ／花药．第二，甘露醇预处理溶液的PH值不同，其预处理 的效果也不同．其中，愈伤组织诱导率和绿苗产量均以pH5.6最高．第三，不同浓度(0.1--0.5mol/L) 的山梨醇预处理3天绿苗产量差异不显著；但同一浓度(0（.3mol/L)山梨醇预处理不同夭数(1-7天）绿 苗产量差异极显著．以3天处理效果最好，绿苗产量是对照的51.2倍． 关键词 大麦，预处理，甘露醇，山梨醇，PH位 EffectsoftheDifferentPretreatmentMethodsonBarley (HordeumvulgareL.)AntherCulture Liw cnzc (Dept.ofAgronomy,LaiyangAgriculturalCollege,Laiyang,Shandong265200) Hu Han (InstituteofGenetics,AcademiaSinica,Beijing100101) 如果花药或花粉从植株上取下直接接种进行培养，愈伤组织诱导率及绿苗产量都非常低 （）‘．如果花药在接 种以前或以后采用适当的方法进行预处理，能使绿苗产量成百倍至千倍的增加(I（,2)．在花药培养中被采用的预 处理方法很多，包括高温预处理、低温预处理、离心、射线及甘露醉预处理等方法 3（，．具体采用什么方法因材 料而异．在大麦花药培养中，主要采用低温预处理 ”〔和甘露醇预处理(2（)．李文泽等(2)报道采用低温预处理可 以使大量材料获得较高的绿苗产量．目前．关于甘露醇预处理的研究只限于单一材料 I（gri)，表现作用效果极 好，并且比采用低温预处理可以缩短实验周期30-45天 2（)．但是，甘露醇预处理是否也适合于大麦材料，至今无 研究报道．本文研究了甘露醇预处理的适应性以及预处理溶液的pH位对处理效果的影响，并首次将山梨醇预处 理应用到大麦花药培养中，提高了花药培养效果，为阐明小抱子脱分化的机理提供依据． I材 料 与 方 法 甘露醉预处理的适应性实验采用17种材料表（1)，其它所有实验处理均以普通大麦H（ordeumvulgareL,}品种 Igri为材料进行研究．供试材料于1992年和 1993年3月上旬播种于中国科学院遗传所实验田．5月初开始取材 料．取材的适宜时期为单核中期．山梨醇预处理从大田取适宜时期的材料，经消毒后，将花药直接接种到含有 hni不同浓度的山梨醇溶液的培养111(30x15mm）内，预处理1-7天，花药接种密度为60枚 ／ml．然后吸出 山梨醇溶液，加入 1m1新鲜诱导培养基进行培养．甘露醇预处理的具休方法和诱导培养基、分化培养基的成份 以及实验所采用的参数同李文泽等 2（，报道． 6 遗 传 HEREDITAS(Beijing)1995 17卷 2结 果 与 讨 论 2.1甘露醇预处理适应性研究 17种供试材料经过0.3mol/L甘露醇预处理3夭，其愈伤组织诱导率、绿苗分化率及绿苗产量均存在明显 差异表（1)．愈伤组织诱导率最高的材料为Igri，达到38.00块 ／花药；最低的材料为 （韭（崎 10号x甘木二条） x韭崎10号〕x韭崎10号F,，仅能产生3.94块／花药．绿苗分化率以 〔甘（木二条xIgri)xIgri〕xIgriF, 最高，达到24.47%;最低的材料为 〔鬼（怒1号x早熟3号）x鬼怒1号〕x鬼怒1号F,，仅有2.00%．而绿苗 产量以Igr