解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠Thbs1、E-cad基因去甲基化和蛋白诱导表达的影响.pdfVIP

上海中医药杂志2014年第48卷第7期 SH．J．TCMJu1．，2014；Vo1．48No．7 ·79· 解毒化瘀健 脾方对 胃黏膜异型增 生模 型大 鼠 Thbsl、E—cad基因去甲基化和蛋白诱导表达的影响 李志钢 ，张 伟。，邱作成 ，纪 勇。，李 玲。，夏宽宏 1．新疆维吾尔自治区中医医院专家门诊部(新疆 乌鲁木齐 830000)；2．新疆维吾尔 自治区中医医院耳鼻喉科 (新疆 乌鲁木齐 830000)；3．新疆维吾尔 自治区中医医院分子实验中心(新疆 乌鲁木齐 830000)；4．新疆维吾尔 自治区中医医院病理科 (新疆 乌鲁木齐 830000) 【摘要】 目的 观察解毒化瘀健脾方对 胃黏膜异型增生模型大 鼠血小板反应蛋 白1(thrombospondin1，Thbs1)和 E钙·黏蛋 白 (E．cadhefin，E．cad)基因甲基化状态和蛋白表达的影响，探讨解毒化瘀健脾方治疗 胃黏膜异型增生的作用机制。方法 采用低浓度 MNNG(N一甲基．N．硝基 N．亚硝基胍)的综合造模方法，建立实验性胃黏膜异型增生大鼠模型；分模型对照组、西药维甲酸治疗组、解毒 化瘀健脾方治疗组，并选择正常大鼠作为阳性对照组；应用甲基化特异 PCR技术检测大鼠胃黏膜THBS1、E—cad基因甲基化状态；Real- timePCR、免疫组化技术检测Thbsl和E．cad在mRNA和蛋白表达水平的变化。结果 模型组胃黏膜异型增生细胞Thbsl的甲基化阳性 检出率为25．oo％，显著高于正常对照组的0．00％(P0．05)；模型组E—cad基因的甲基化阳性检出率 (33．33％)高于正常对照组 (16．67％)，但差异不显著(P0．05)；解毒化瘀健脾方组Thbsl及E—cad甲基化阳性检出率相比，模型组显著降低为0．0o％(P0．05)； 解毒化瘀健脾方组Thbsl和E．cadmRNA (P0．05，P0．01)和蛋白表达(P0．05，P0．01)水平均显著高于模型组。结论 解毒化 瘀健脾方可能通过对异型增生 胃黏膜细胞Thbsl、E—cad基因的去甲基化和诱导蛋白表达量的增加，实现对 胃黏膜异型增生的治疗作用。 【关键词】 胃黏膜异型增生；解毒化瘀健脾方；血小板反应蛋白1；E一钙粘蛋白；甲基化 【中图分类号】 R285．5 【文献标志码】 A 【文章编号】 1007—1334(2014)07—0079—06 Effectof ‘J‘ieduHuayuJianpiDecoction”ondemethylationandinducibleexpressionofThbsland E-cadgeneingastricmucosadysplasiaratscells LIZhi—gang，ZHANGWei，QIUZuo-cheng，JIYong，LILing，XIAKuan-hong XinjiangUygurAutonomousRegionHospitalofTraditionalChineseMedicine Abstract：Objective Toobservetheeffectof“JieduHuayuJianpiDecoction”onthemethylationstatusandtheexpressionofthmmbospondin1(Thbs1)， E—Cadherin(E—cad)inratswithgastricmucosaldysplasia(GMD)，andtoexploreitspossiblemolecularmechanism．Methods Weusealowconcentrationof MNNG (N—methyl—N ·nitro—N—nitrosoguanidine)integratedmodelingmethod，establishedtheexperimentalratmodelwithGMD；theanimalmodelratswere randomlydividedinto：modelcontrolgroup，westernmedicineretinoicacidtreatmentgroup，“JieduHuayuJianpiDecoction”treatmentgroup，andthenormalrats wereselectedas thepositivecontrolrgoup；themethylationSpecificPCR techniquewas usedtodetectthemethyla