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植物转基因过程 DNA分子杂交技术 基础梳理 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过__________或__________,对现有蛋白质进行__________,或制造一种__________,以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产_______________的蛋白质) 蛋白质工程的崛起 自然界已存在 基因修饰 基因合成 改造 新的蛋白质 高考总复习.生物 高考总复习.生物 * 高考总复习.生物 * 高考总复习.生物 选修3 现代生物科技专题 专题1 基因工程 基础梳理 DNA重组技术的基本工具 1.基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过__________和__________,赋予生物以__________的遗传特性,创造出符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在__________上进行设计和施工的,又叫做__________。 DNA重组技术 体外DNA重组 转基因技术 新 DNA分子水平 2.基因工程的基本工具 (1)“分子手术刀”—— __________ ①来源:主要是从__________中分离纯化出来的。 ②功能:能够识别双链DNA分子的某种__________的核苷酸序列,并且使每一条链中__________部位的两个核苷酸之间的__________断开,因此具有__________性。 ③结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:__________和__________。 专一 限制性核酸内切酶(限制酶) 原核生物 特定 特定 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 (2)“分子缝合针”——__________ ①两种DNA连接酶(大肠杆菌DNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较: a.相同点:都缝合__________键。 b.区别:大肠杆菌DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的__________之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合_____________。 ②与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将__________加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接__________的末端,形成磷酸二酯键。 DNA连接酶 磷酸二酯 黏性末端 两种末端 单个核苷酸 两个DNA片段 (3)“分子运输车”——__________ ①运载体具备的条件 a.能在受体细胞中复制并稳定保存。 b.具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。 c.具有标记基因,供重组DNA的鉴定。 ②最常用的运载体是__________,它是一种裸露的、结构简单的、独立于__________核区DNA之外,并具有__________的双链__________DNA分子。 ③其他运载体:__________、__________。 动植物病毒 载体 质粒 细菌 自我复制能力 环状 噬菌体 归纳整合 一、基因工程的概念 剪切→拼接→导入→表达 基本过程 DNA分子水平 操作水平 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 基因 结果 人类需要的基因产物 ①解旋酶:该酶能在DNA复制或转录时破坏DNA碱基对间的氢键,从而将双螺旋打开。 ②DNA水解酶:该酶能催化DNA水解。 ③RNA聚合酶:该酶能在转录时将单个的核糖核苷酸连接成RNA单链。 ④限制酶:该酶的作用是识别特定的核苷酸序列,并在特定位点上切割DNA分子。 区分以下几种酶 注 :①用限制酶切割DNA分子时,被破坏的是DNA链中的磷酸二酯键(即连接相邻两个脱氧核苷酸的键)。 ②黏性末端是指双链DNA分子被限制酶切开后,切口处的两个末端伸出的由若干特定核苷酸组成的单链。 DNA连接酶 ①运载体DNA必须有一个或多个限制酶的切割位点,以便目的基因可以插入到运载体上去。 ②运载体DNA必须具备自我复制能力,或可以整合到受体染色体DNA上随受体染色体DNA的复制而同步复制。 ③运载体DNA必须带有标记基因,以便重组后进行重组分子的筛选。 运载体 跟踪训练 (2008 年全国卷Ⅰ)已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如下图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是( ) A.3 B.4 C.9 D.12 C 解析:从这三个切点进行酶切,可得到片段种类有四种(即a、b、
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