产褐藻胶裂解酶芽孢杆菌的选育及其产酶性质的研究.pdf

产褐藻胶裂解酶芽孢杆菌的选育及其产酶·陛质的研究 摘要 本文以一株土壤来源的芽孢杆菌为出发菌，在以褐藻酸钠为唯一 碳源的培养基中驯化筛选后得到一株产胞外褐藻胶裂解酶的菌株S1， 通过菌种鉴定，确定其为枯草芽孢杆菌(肋cj』』ussubtiJis)。该菌 产酶的较适碳源为0．5％(质量分数)的褐藻酸钠，较适氮源为蛋白 时，酶活最高可达18．79U／mL。 以菌株sl为出发菌株，进行复合诱变和选育，获得一株酶活力 显著提高，生物学性状稳定的突变株EMS-50，其发酵液酶活力从18．94 U／mL提高到43．22U／mL(DNS法)。 该酶为胞外诱导酶，甘露糖与褐藻酸钠均可诱导其合成褐藻胶裂 解酶，葡萄糖可促进以褐藻酸钠为诱导物时酶的合成。以蛋白胨+尿 素+酵母膏为氮源时产酶较好。通过正交实验，确定了其最佳发酵培 养基组成为：褐藻酸钠0．6％，尿素0．6％，蛋白胨0．6％，葡萄糖0．2％， 最高酶活达到75．86U／mL。 发酵液经硫酸铵沉淀后制得粗酶液，用于酶学性质的研究。该酶 K+、 温度在20—400时该酶具有