番木瓜proteinaseomega基因启动子的克隆及功能初步研究.pdfVIP

云 南 植 物 研 究 2005 , 27 ( 5) : 545～551 Acta Botanica Yunnanica 番木瓜 proteinase omega 基因启动子的克隆 及功能初步研究  杨英军1, 2 , 周 鹏1 ( 1 中国热带农 业科 学院热 带生 物技术 研究所 、热 带作物 生物 技术 国家重 点实验 室 , 海南 海 口 57 1101; 2 河 南科 技大学 , 河 南 洛 阳 47100 3) 摘要 : 采用 PCR 技术从番木瓜基因组中克隆了 proteinase omega 基因的部分序列及其 5′侧翼序 列。序列分析表 明, 克隆到的基因序 列与 GenBank 中的序列 同源性为 96% , 长 1039 bp 的 5′ 端侧翼序列在 GenBank 数据库 中没有 同源 片段 。预测 5′端侧翼序列有两处基础启动子区域 , 转录起始位点 ( TSS ) 分别为是 A , T。在 基础 启动子区域 都存在 TATA-box, 上游 发现 多处 CAAT-box , G-box , I-box 等顺式作用元件和 AT 富含区。构建了植物表达载体并用基因枪轰击 番木瓜的叶组织 , GUS 基因瞬间表达结果表 明, 该长 1 039 bp 的 5′端侧翼序 列具有驱动 GUS 基因在乳管中表达 的功能。该启动子的发现对进一步研究启动子的功能和开发番木瓜作为生 物反应器具有重要意义 。 关键词 : 番木瓜 ; proteinase omega ; 启动子; 克隆; 序列分析 中图分类号: Q 75 文献标识码 : A 文章编号 : 0253 - 2700 (2005) 05 - 0545 - 07 Cloning and Functional Analysis of a Novel Proteinase Omega Promoter from Carica p ap ay a 1 , 2 1 ** YANG Ying-Jun , ZHOU Peng ( 1 National Key Biotech nology Labora tory f or Tropical Crops , Ins titute of Bioscience and B iotechnology , CA TAS , Haikou , 57 1101, China ; 2 Hen an University of Science an d Technology , Luoyang 47100 3 , China ) Abstract: Proteinase omega was a kind of proteinase in papaya ( Carica papaya L .) laticifer s . A 5′ flanking sequence and partial gene sequence of proteinase omega were isolated from the genomic DNA via PCR technology . DNA sequence analysis