卵黄抗体作用机制及应用效果的研究.docVIP

课程结课论文 课程名称 论文题目 专 业 班级 姓 名 学号 任课教师 年 月 日 卵黄抗体作用机制及应用效果研究 郑学农 摘要：通过体外细胞粘附试验和饲养试验研究卵黄抗体作用机制及卵黄抗体粉预防断奶仔猪腹泻和改善生产性能的作用。90头30±2日龄断奶仔猪，按血缘、体重、胎次、日龄和性别随机分成4组，每组分3栏饲养。对照组饲喂玉米—豆粕型基础日粮；分别在基础日粮中添加0.5%、1%、2%的喷雾干燥卵黄抗体粉形成试验一组、二组和三组。 关键词：卵黄抗体；粘附；腹泻；断奶仔猪 The Research of the Active Mechanism and Efficiency of Egg yolk Antibodies《英文摘要不写》 ZHENG Xue-nong Abstract: The active mechanism and efficiency of egg yolk antibodies was evaluated by in vivo and vitro experiments. 90 28 - 32 - days - old piglets (weaning) were selected and allotted to four groups. All diets were formulated to meet NRC re- quirement. The control group were fed the com - soybean diet, experimental group 1, 2 and 3 were fed respectively a diet with 0.5 %, 1% and 2% egg-yolk antibodies powders. Key words: egg yolk；adhesion；diarrhea；weaned piglet 前言 随着规模化养猪业的迅速发展和生产管理的高度集约化，断奶仔猪腹泻是困扰现代养猪业的主要难题之一。从ETEC超免母鸡的蛋黄中获得卵黄抗体(1gY)不仅在理论上切实可行而且与从其它哺乳动物(如鼠、兔、猪、马、牛等)血液中获得抗体相比，卵黄抗体具有产量高，化学性质稳定等优越性。近年来用ETEC黏附素免疫蛋鸡获得抗黏附素卵黄抗体具有效价高、特异性强等优点而受到大量研究。其作用机制一般认为卵黄抗体通过与ETEC粘附素发生特异性的结合，从而阻止了ETEC与粘膜的粘附，防止ETEC感染性腹泻的发生。 本试验旨在通过体外细胞黏附试验研究卵黄抗体对细胞黏附的抑制作用机制；并通过在断奶仔猪饲料中添加抗ETECK88ac黏附素卵黄抗体粉，研究卵黄抗体粉对控制仔猪腹泻、改善生长性能的作用。 1 材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 菌株C83901(08：K88ac) 株购自中国农科院兽医药品监察所；卵黄抗体粉由华中农业大学猪遗传育种农业部重点实验室自行研制。 1.1.2 试验动物 90头（30±2）日龄断奶仔猪选自湖北省粮油进出口公司长流畜牧公司出口二厂。 1.1.3 试剂 生理盐水：0.9 gNaCl溶于90 ml蒸馏水中，定容至lOO ml，于121℃高压灭菌15 min备用 pH 7.4柠檬酸钠：NaCl 96 mM，KCl 1.5 mM，KH2P04 8 mM，Na2HP04 5.6 mM，柠檬酸钠27 mM，于1210C高压灭菌15 min备用 1.1.4 主要仪器 高速冷冻离心机(德国Beckman公司) SHZ—88式水浴恒温振荡器(江苏太仓实验设备厂) YJ—1450型无菌操作台(苏州安泰空气技术有限公司) ZXCZ生物显微镜(上海光学仪器五厂) 血球计数板 常规手术用具 1.2 试验方法 1.2.1 体外细胞黏附试验 空肠上皮细胞分离 空肠粘膜上皮细胞的分离采用调整后的Weiser法，断奶仔猪屠宰后30 min内取大约50 cm长的空肠，用370C生理盐水冲洗数次去除肠腔内容物，再用含1mM二硫苏糖醇(DTT)的生理盐水冲洗2次，然后灌入pH 7.4的柠檬