参芪复方对GK大鼠心肌细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax及NO的影响.pdfVIP

2009年 l2月第26卷第6期 天 津 中 医 药 Dec．2009，Vo1．26 No，6 TianjinJournalofTraditionalChineseMedicine 489 参芪复方对GK大鼠心肌细胞凋亡 相关因子Bcl-2＼Bax及NO的影响 康 健 ，刘 桠 。，谢春光 。，殷丽平 。 (1．成都中医药大学附属医院肛肠科，成都 610075；2．成都中医药大学，成都 610075； 3．成都中医药大学附属 医院，成都 600175) 摘要：[目的]研究参芪复方对GK大鼠心肌细胞凋亡相关因子 Bcl一2、Bax及一氧化氮(NO)的影响及其可能作用 机制。[方法】GK大鼠腹腔注射 N一硝基一L一精氨酸甲酯(L—NAME)，同时给予高脂饮食复制 2型糖尿病(T2DM)心肌 病变模型。选择随机血糖≥11．1mmolL／的GK大鼠随机分为4组：模型组、中药高、低剂量组、西药组，另设正常Wistar 大鼠作正常对照组，共 5组动物。治疗4周后，统一取心肌标本 ，通过免疫组化等测量方法，对照观察各组药物对GK 大鼠一般状态、心肌NO、心肌Bcl一2、Bax蛋白表达的影响。 结【果】GK大鼠的上述指标存在明显异常。参芪复方特别 是其高剂量组能改善其一般状态、升高心肌NO(P0．01)，升高心肌细胞凋亡抑制因子Bcl一2的表达(PO．O1)，降低促 细胞凋亡因子Bax表达 (尸0．05)和Bax／Bcl一2比值 (PO．01)。 结【论】凋亡相关因子Bcl～2和 Bax与NO参与糖尿病 心肌损伤过程，参芪复方能升高心肌NO，降低心肌Bax表达，升高Bcl一2表达。 关键词：参芪复方；GK大鼠；糖尿病 ；心肌损伤；心肌细胞凋亡 中图分类号 ：R285．5 文献标识码：A 文章编号 ：1672—1519(2009)06—0489—04 参芪复方是成都中医药大学谢春光教授的经验 1．2 动物模型的建立与分组 自发性 T2DMSPF 方，主要 由人参、黄芪、山药、山茱萸、生地、天花粉 、 级GK大鼠50只，4月龄，雄l生；正常Wistar大鼠11只； 丹参等组成，具有益气养阴，活血化瘀作用，体现了 由中国科学院上海实验动物中心提供。按2～3只／笼 临床上糖尿病的常用治法。以往研究显示参芪复方 饲养于独立通气笼具(tvc)系统内。50只GK大鼠 具有抗2型糖尿病(T2DM)早期动脉粥样硬化、低度 适应性饲养 1周后，依据血糖值高低排号，随机血糖 炎症的作用 ，但其对心肌细胞的影响未见报道， 小于 11．1mmol／L者共 l0只剔除，余 40只查随机数 实验观察益气养阴、活血祛瘀的参芪复方对 GK大 字表将其分为4组 ，1O只／组 ，分别为模型组 、西药 鼠实验f生糖尿病性心肌病心肌细胞凋亡相关因子的 组、中药低剂量组、中药高剂量组。另设Wistar大鼠 影响，并初步探讨其可能作用机制。 11只为正常对照组。总计为 5组。在实验期 间 1 材料 Wistar大鼠摄食普通饲料；4组GK大鼠参照文献方 1．1 药品与试剂 参芪复方浸膏粉剂：每克浸膏粉 法造模 ：10mg／(kg·d)腹腔注射一氧化氮合酶 剂相当于原生药 10g，由华西医学中心制药厂生产 ， (NOS)抑制剂一L—NAME连续4周 ，同时摄食高脂 生产批号使用时用生理盐水配制。雷米 饲料。 普利(商品名：瑞泰)(5mg／片)：AventispharmaS．P． 1．3 给药及方法 中药高、低剂量组分别予以参芪 A(意大利)生产，批号：IA20。N一硝基一L精氨酸甲酯 复方粉剂混悬液 2．88、0．72g／(kg·d)，西药组 ，予以 (L—NAME)：Sigma公司产品，批号 ：SL06176，一20oC 雷米普利水溶液 1mg／(kg·d)，模型组与正常对照组 保存。一氧化氮(NO)试剂盒 ：南京建成生物工程研 均予以生理盐水 5mlJ(kg·d)灌喂，共 4周。 究所，批号Bcl一2与Bax免疫组化试