黄芪注射液及其有效成分对乳腺癌细胞增殖和Akt磷酸化的影响.pdfVIP

中西医结合学报 2009年 l2月第 7卷第 12期 JournalofChineseIntegrativeMedicine，December2009，Vo1．7，No．12 formononetinandastragalosideⅣ plUSformononetindecreasedlheexpressionsOfP—Akt(Thr308)andD—Akt (Ser473)jnMDA—MB一468cel_s．Formononetinandastragalosjde IV plusformononetjndown—regulatedihe expressionOfD—Akt(Thr308)proteininMDA—MB一231cellsafter1一and2-dayCUllure。buthadnoeffectson theexpressionOfP—Akt(Ser473)ProteininMDA—MB一231cells． Conclusion：Astraga／usfnjection，astragafOSideⅣ andformononetincanfnhfbftpro{iferation0fbreasfcancer celIlines MDA—MB一468 and MDA—MB一231， and ihe antiproI{feration effects vary according to Iheir concenlralions．AndlheantiPro erationmechanismSmaybe reIated iO lheirdown—regUIaiioneffectsor]Akt phOsphOryIaiiOn． Keywords：Astragalusinjection；astragalosideVI；formononetin；breastcancer；celIproliferation；phospho— Aki 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一 ，我 国乳 1708)和兔 p-Akt(Ser473)多克隆抗体 (批号 ：B一 腺癌的发病率呈逐年上升趋势，在京津沪等大城市， 1508)均购 自美国SantaCruz公司 ；odyssey羊抗兔 乳腺癌发病率已居女性恶性肿瘤之首_I]。根据组织 二抗 ，由曙光医院骨伤科赠送。 学、免疫组织化学及分子生物学技术 ，乳腺癌可分为 1．2 实验方法 不同的亚型。其中，basal—like型乳腺癌具有高侵袭 1．2．1 MTT法检测黄芪注射液、黄芪 甲苷和芒柄 性，预后差 ，发病年龄较轻，较易发生局部复发和远 花素干预乳腺癌细胞株 MDA—MB一468和 MDA— 处转移等特点。而且该类型乳腺癌患者无法从常规 MB一23l的量效和时效关系 取对数生长状态 良好 内分泌治疗和抗 Her一2靶 向治疗 中获益 。因此，探 的MDA—MB一468和 MDA—MB一231细胞 ，制备单细 索中医药对该亚型乳腺癌 的干预作用具有重要 意 胞 悬 液，调 整 MDA—MB一468细 胞 浓 度 为 2．5× 义。黄芪为临床常用的一味中药 ，近年来有研究报 1O个 ／mL，以每孔 5×1O的量接种于 96孔板 ，调整 道 ，黄芪在体 内体外都有抗肿瘤作用 ，其有效作用成 MDA—MB一231细胞浓度为 5×10个／mL，以每孔 分的研究也较为活跃，其中主要 的皂苷类和黄酮类 1×1O的量接种于96孑L板 ，接种 2d后细胞生长基 成分成为研究 的热点 。本实验通过观察黄芪注射 本融合后 ，分别加入黄芪注射液 、黄芪 甲苷和芒柄花 液 、黄芪皂苷类成分黄芪 甲苷和黄酮类成分芒柄花 素。通过MTT法计算出各药物的半数抑制浓度 ， 素对basal—like乳腺癌细胞株MDA—MB一468、MDA— 筛选出药物浓度。黄芪注射液的终浓度分别达到生 MB231的增殖和磷酸化 Akt(phospho—Akt，P— 药含量为 1g／mI和0．1g／mI；黄芪 甲苷的终浓度 Akt)蛋白表达的影响 ，探讨其作用机制。 分别为 8O g，／mI、40pg／mL和 2O g，／m