重组EGFR-γFc融合DNA疫苗联合热疗抗肿瘤免疫的实验研究.pdfVIP

第3O卷第 6期 同 济 大 学 学 报 (医 学 版 ) Vo1．3ONO．6 2009年 l2月 JOURNALOFTONGhUNIVERSITY (MEDICALSCIENCE) Dec．，2009 · 基础 研究 · 重组 EGFR—VFc融合 DNA疫苗联合热疗 抗肿瘤免疫的实验研究 武建毅 ，刘 岽 ，唐 亮 ，谈立松 ，黄晓冬 (1．上海市普陀区人民医院肿瘤科，上海 200060；2 同济大学附属肺科医院肺癌免疫研究室，上海 200433) 【摘要】目的 构建EGFR一Fc融合DNA疫苗并观察其联合41oC热疗对小鼠移植肿瘤的抑制作用。方法 以异 种同源鸡 EGFR膜外部分与IgG的 Fc段的基 因片段为基础构建真核表达质粒PVAX1／cEGFR．Fc，免疫荧光法 检测融合蛋白在真核细胞中的表达，随后将Lewis肺癌移植瘤小鼠随机分为疫苗组、热疗组、合并组和对照组。疫 苗组于每只小鼠双侧股四头肌注射 100Ixg重组质粒，每5d重复 1次，共 3次；热疗组对荷瘤小鼠行局部4l℃热 疗，每5d重复 1次，共3次；联合组小鼠按疫苗组小鼠的同样方法注射质粒后同时行局部热疗；对照组小鼠注射生 理盐水。末次处理5d后ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞上清液中细胞因子 -2和 IFN一 的水平，流式细胞仪测定 脾细胞淋巴细胞亚群；观察小鼠荷瘤后的生存率；末次处理后 14d部分成瘤动物处死，取出瘤体称重，计算抑瘤率。 结果 联合组小鼠脾淋 巴细胞TH1型细胞 因子几-2和 IFN一^y浓度较其他各组明显升高(P0．01)，CD8 T淋 巴细 胞数 目增加 (P0．01)，接瘤后 14d联合组平均瘤重低于其他各组(P0．01)，抑瘤率达70％，接瘤后 30d联合组 动物生存率也高于其他各组。结论 41℃热疗可能通过细胞免疫增强EGFR靶向DNA疫苗的抗肿瘤效果，热疗 联合EGFR靶向DNA疫苗可能是一种有希望的抗肿瘤途径。 【关键词】热疗；肿瘤；DNA疫苗；表皮生长因子受体；IgG~／Fc 【中图分类号】R392．11 【文献标志码】A 【文章编号】1008—0392(2009)06—0034—06 Experimentalstudyofantitumoreffectofhyperthermiacombined with therecombinantEGFR- cinfusion DNA vaccine WUJian．yi， Dong ，TANGLiang ，ATN Li—song ，HUANGXiao．dong。 (1．Dept．ofOncology，ShanghaiPutuoPeople’SHospital，PutuoDistrict，Shanghai200060，China； 2．ImmunologyInstituteofLungcnacer。PulmonaryHospital，Ton~iUniversity，Shnaghai200433，China) 【Abstract】Objective Toevaluatetheefficacyofhyperthermiaat41oCcombinedwiththerecombinant EGFR-7FcinfusionDNA vaccineonxenograftsinmice．M ethods Extracellulardomainofxenogeneicchicken epidermal growthfactorrceeptorfused withrabbitIgG Fcwassuccessfully inserted into PVAX1eukaryotic expressionvcetorto constructhterceombinna tPVAX1／cEGFR-FcDNA vaccine．Expression ofhteufsion proteinine