光合作用是绿色植物在叶绿体内利用植物色素将光能转变为.pdfVIP

植物生理學實驗 一、前言 光合作用是綠色植物在葉綠體內利用植物色素將光能轉變為化學能並釋放 出氧氣的一種機制，再利用此能量將二氧化碳與水將之轉變為葡萄糖與氧氣的能 量轉換作用。在高等綠色植物中與光合作用有關的色素為葉綠素 a 、葉綠素b 、 類胡蘿蔔素及葉黃素等，其中葉綠素 a 為主要進行光反應的色素，故又稱主色 素，其餘色素則可吸收光能傳遞給葉綠素 a 進行光反應，故葉綠素 b 、類胡蘿蔔 素及葉黃素等色素又稱輔助色素。 本實驗主要利用有機溶劑萃取等化學方法進行植物色素的抽取與分離，由於 此四種植物色素對太陽光的吸收光譜不同，一般葉綠素 a 與葉綠素 b 均在紅光 及藍光區具有吸收能力；類胡蘿蔔素及葉黃素的吸收光譜則主要是藍光區 ( 圖 11-1) 。使用分光光度計 (Spectrophotometer) 可用來測定所分離到的四種植物色素 萃取層之吸光波長；而且可比較不同植物之各色素萃取層的濃度及吸收光譜之差 異。 圖 11-1 葉綠素 a, b, 及類胡 蘿蔔素的吸收光譜 65 實驗十一 植物色素的化學萃取與吸收光譜分析 二、材料與藥品 各組需準備： 綠色植物葉片兩種或以上，各 2 g 丙酮 (80% acetone) 150 mL 石油醚 (petroleum ether) 50 mL 甲醇 (methyl alcohol) 100 mL 乙醚 (ethyl ether) 50 mL 氫氧化鉀 (potassium hydroxide KOH) 15 g 燒杯 2 個 漏斗 1 個 錐形瓶 4 個 濾紙 2 張 研缽 1 組 分液漏斗架 1 組 分液漏斗 (250 mL) 1 個 共用藥品及儀器為： 錫箔紙 1 捲 分光光度計 1 台 天平 1 台 三、實驗方法 (一) 綠色植物色素之簡易丙酮萃取方法及定量： 1. 取欲分析之植物葉片 2 g 置於研缽內研磨至碎片狀；再加入 20 mL 80% 丙酮繼續研磨使溶液呈深綠色漿狀。 2. 取濾紙置於漏斗中，下置燒杯；取研磨後含植物色素之丙酮液經濾紙過濾， 取濾液將之置於黑色背景處將可見葉綠素 a 呈血紅色的螢光現象。將濾出 的綠色溶液盛於錐形瓶中並以錫箔紙密封，以免揮發。 3. 刮下留在濾紙上的葉片殘渣於研缽中，加入 20 mL 80% 丙酮重複研磨並 過濾二至三次，以儘量抽出葉片殘渣中的植物色素。 66 植物生理學實驗 4. 以 10 mL 80%