棉花植株再生和农杆菌介导Enhancer+trap遗传转化.pdfVIP

摘要 棉花是我国最重要的经济作物之一，也是我国受虫害影响最严重的农作物之一。 利用遗传工程技术改良棉花品种能够提高棉花的种植效益，然而目前棉花的生物技 术的发展仍然存在着很多问题，主要表现在棉花遗传转化周期长、导致再生植株的 体细胞变异很严重，棉花体细胞胚胎发生对基因型依赖性很强等等。这些问题已经 成为棉花生物技术、棉花功能基因的验证和棉花相关基因克隆等研究领域的障碍和 瓶颈。 测不同Enhancertrap系中报告基因的表达模式来发掘新基因及其调节序列。 本研究通过建立高效棉花遗传转化体系，采用农杆菌介导的转基因方法，旨在 创建棉花T-DNA插入的Enhancer-trap突变系。主要研究结果如下： 1为了提高棉花遗传转化效率，针对转化过程中的一些重要影响因素，如菌株、 AS、菌液浓度、共培养时间等做了一系列分析实验。实验结果显示：农杆菌浓度 培养温度19℃，暗培养48小时，能够获得较高的转化效率；不同菌株对棉花品种 传转化。 浓度的降低，愈伤块发绿、变硬、不利于愈伤分化成胚性愈伤。 3通过体细胞胚胎发生与农杆菌介导的遗传转化方法，获得了转基因棉花YZl 功将目的基因片断转入到棉花基因组中并成功表达。 4报告基因(gusgcne)在抗性愈伤、胚性愈伤、幼胚和再生植株根部均能表 达，经组织化学染色，在愈伤组